实验七EAC玫瑰花环试验 B淋巴细胞表面有补体受体，红细胞可与相应的抗体（溶血素）结合形成抗原抗体复合物 (E),通过补体经典途径活化补体，而产生活化的C3,C3与EA及B细胞结合，形成花环， 即EAC玫瑰花环，以供计数B淋巴细胞。 [目的要求] 1,熟悉EAC玫瑰花环试验的原理。 2.熟悉EAC玫瑰花环试验的操作方法。 [材料与试剂] 1,基本同EA玫瑰花环试验。 2.补体：当日采集豚鼠混合血清，用Hank's液稀释成1：100，置4℃保存备用。 操作方法] 1,EAC悬液的制备：取4%鸡红细胞2ml于试管中，加入1：4000稀释的溶血素2ml, 混匀，置37℃水浴15min,取出后离心，用Hank's液洗涤2次，再以2 ml Hank's液稀释沉 淀细胞，加1：100稀释的补体2ml,混匀，放置37℃水浴15min取出，用Hank's液洗涤2 次，配成4%EAC细胞悬液。 2.取淋巴细胞悬液0.2m1于试管中，加入4%的EAC悬液0.2ml,混匀，室温作用30min, 1000r/min离心5min,吸弃过多的上清液，置4℃2-4h 3。同定，制片，染色同EA玫瑰花环试验。 4.结果判定：同EA玫瑰花环试验。 [注意事项] 1.同EA花环形成试验。 2.补体应现用现采集。 [思考题] 1.EAC玫瑰花环试验的原理是什么？ 2.实验中所需补体为什么现用现采集？