(2)致变性作用要小(甲醇) (3)毒性要小、挥发性适中 (4)水溶性要好 6、影响有机溶剂沉析的主要因素 (1)温度:低温有利于防止溶质变性;有利于提高收率(溶解度下降); (2)搅拌速度:散热 (3)溶液pH值:原则是避免目标蛋白与杂质带有相反的电荷,防止共沉现象。 (pI (4)离子强度:离子强度低有利于沉析,001~0.05molL (5)样品浓度:0.5~2% 稀:溶剂用量大,回收率低,但共沉淀作用小 浓:节省溶剂用量,共沉作用强,分辨率低 (6)金属离子的助沉析作用:Zn2+、Ca2+ 八、等电点沉淀法 1、概念 调节体系pH值,使两性电解质的溶解度下降,析岀的操作称为等电点沉淀。 2、原理 蛋白质是两性电解质,当溶液pH值处于等电点时,分子表面净电荷为0, 双电层和水化膜结构被破坏,由于分子间引力,形成蛋白质聚集体,进而产生沉 淀。 Fraction of Protein Precipitated versus pH（2）致变性作用要小（甲醇） （3）毒性要小、挥发性适中 （4）水溶性要好 6、影响有机溶剂沉析的主要因素 （1）温度：低温有利于防止溶质变性；有利于提高收率（溶解度下降）； （2）搅拌速度：散热 （3）溶液 pH 值：原则是避免目标蛋白与杂质带有相反的电荷，防止共沉现象。 （pI） （4）离子强度：离子强度低有利于沉析，0.01~0.05mol/L （5）样品浓度：0.5~2% 稀：溶剂用量大，回收率低，但共沉淀作用小 浓：节省溶剂用量，共沉作用强，分辨率低 （6）金属离子的助沉析作用：Zn2+、Ca2+ 八、等电点沉淀法 1、概念： 调节体系 pH 值，使两性电解质的溶解度下降，析出的操作称为等电点沉淀。 2、原理： 蛋白质是两性电解质，当溶液 pH 值处于等电点时，分子表面净电荷为 0， 双电层和水化膜结构被破坏，由于分子间引力，形成蛋白质聚集体，进而产生沉 淀