的酶标抗体愈少，因此阳性反应呈色浅于阴性反应。如抗原为高纯度的，可直接包被固相。如抗原 中会有干扰物质，直接包被不易成功，可采用捕获包被法，即先包被与固相抗原相应的抗体，然后 加入抗原，形成固相抗原。洗涤除去抗原中的杂质，然后再加标本和酶标抗体进行竞争结合反应。 竞争法测抗体有多种模式，可将标本和酶标抗体与固相抗原竞争结合，抗Bc ELISA一般采用 此法。另一种模式为将标本与抗原一起加入到固相抗体中进行竞争结合，洗涤后再加入醇标抗体， 与结合在固相上的抗原反应。抗B的检测一般采用此法。 2.2.5竞争法测抗原 小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的位点，因此不能用双抗体夹心法进行测定，可 以采用竞争法模式。其原理是标本中的抗原和一定量的碑标抗原竞争与固相抗体结合。标本中抗原 量含量愈多，结合在固相上的酶标抗原愈少，最后的显色也愈浅。小分子激素、药物等LISA测定 多用此法。 2.2.6捕获包被法测抗体 IgM抗体的检测用于传染病的早期诊断中。间接法ELISA一般仅适用于检测总抗体或1gG抗体。如 用抗原包被的间接法直接测定1gM抗体，因标本中一般同时存在较高浓度的1gG抗体，后者将竞争 结合周相抗原而使一部份Ig抗体不能结合到固相上。因此如用抗人Ig作为二抗，间接测定Ig 抗体，必须先将标本用A蛋白或抗IgG抗体处理，以除去IgG的干扰。在临床检验中测定抗体IgN 时多采用捕获包被法。先用抗人IgM抗体包被固相，以捕获血清标本中的Ig(其中包括针对抗原 的特异性Ig抗体和非特异性的IgM)。然后加入抗原，此抗原仅与特异性I相结合。继而加酶标 记针对抗原的特异性抗体。再与底物作用，呈色即与标本中的Ig酬成正相关。此法常用于病毒性感 染的早期诊断。甲型肝炎病毒(V)抗体的检测模式见图2-7。 类风湿因子（℉）同样能干扰捕获包被法测定Ig抗体，导致假阳性反应。因此中和IgG的间接法 近来颠受青睐，用这类试剂检测抗CMV IgGM和抗弓形虫IgW抗体已获成功。 2.2.7ABS--ELISA法 ABS为亲和素(avidin)生物素(biotin)系统(system)的略语。亲和素是一种糖蛋白，分子量600O0, 每个分子由4个能和生物素结合的亚基组成。生物素为小分子化合物，分子量244。用化学方法制 成的衍生物素-羟基琥珀酰亚胺酯可与蛋白质和糖等多种类型的大小分子形成生物素标记产物，标记 方法领为简便。生物素与亲和素的结合具有很强的特异性，其亲和力较抗原抗体反应大得多，两者 经结合就极为稳定。由于一个亲和素可与4个生物素分子结合，因此如把AS与ELISA法可分为 酶标记亲和素-生物素(LB)法和桥联亲和素-生物素(ABC)法两种类型。两者均以生物素标记的 的酶标抗体愈少，因此阳性反应呈色浅于阴性反应。如抗原为高纯度的，可直接包被固相。如抗原 中会有干扰物质，直接包被不易成功，可采用捕获包被法，即先包被与固相抗原相应的抗体，然后 加入抗原，形成固相抗原。洗涤除去抗原中的杂质，然后再加标本和酶标抗体进行竞争结合反应。 竞争法测抗体有多种模式，可将标本和酶标抗体与固相抗原竞争结合，抗 HBc ELISA 一般采用 此法。另一种模式为将标本与抗原一起加入到固相抗体中进行竞争结合，洗涤后再加入酶标抗体， 与结合在固相上的抗原反应。抗 HBe 的检测一般采用此法。 2.2.5 竞争法测抗原 小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的位点，因此不能用双抗体夹心法进行测定，可 以采用竞争法模式。其原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合。标本中抗原 量含量愈多，结合在固相上的酶标抗原愈少，最后的显色也愈浅。小分子激素、药物等 ELISA 测定 多用此法。 2.2.6 捕获包被法测抗体 IgM 抗体的检测用于传染病的早期诊断中。间接法 ELISA 一般仅适用于检测总抗体或 IgG 抗体。如 用抗原包被的间接法直接测定 IgM 抗体，因标本中一般同时存在较高浓度的 IgG 抗体，后者将竞争 结合固相抗原而使一部份 IgM 抗体不能结合到固相上。因此如用抗人 IgM 作为二抗，间接测定 IgM 抗体，必须先将标本用 A 蛋白或抗 IgG 抗体处理，以除去 IgG 的干扰。在临床检验中测定抗体 IgM 时多采用捕获包被法。先用抗人 IgM 抗体包被固相，以捕获血清标本中的 IgM（其中包括针对抗原 的特异性 IgM 抗体和非特异性的 IgM）。然后加入抗原，此抗原仅与特异性 IgM 相结合。继而加酶标 记针对抗原的特异性抗体。再与底物作用，呈色即与标本中的 IgM 成正相关。此法常用于病毒性感 染的早期诊断。甲型肝炎病毒（HAV）抗体的检测模式见图 2-7。 类风湿因子（RF）同样能干扰捕获包被法测定 IgM 抗体，导致假阳性反应。因此中和 IgG 的间接法 近来颇受青睐，用这类试剂检测抗 CMV IgGM 和抗弓形虫 IgM 抗体已获成功。 2.2.7 ABS-ELISA 法 ABS 为亲和素(avidin)生物素(biotin)系统(system)的略语。亲和素是一种糖蛋白，分子量 60000， 每个分子由 4 个能和生物素结合的亚基组成。生物素为小分子化合物，分子量 244。用化学方法制 成的衍生物素-羟基琥珀酰亚胺酯可与蛋白质和糖等多种类型的大小分子形成生物素标记产物，标记 方法颇为简便。生物素与亲和素的结合具有很强的特异性，其亲和力较抗原抗体反应大得多，两者 一经结合就极为稳定。由于一个亲和素可与 4 个生物素分子结合，因此如把 ABS 与 ELISA 法可分为 酶标记亲和素-生物素（LAB）法和桥联亲和素-生物素（ABC）法两种类型。两者均以生物素标记的