1、化学法直接合成基因 基因的组装过程 通过化学合成的寡接首酸片最只危达到50-200b的长度, 而一个基因的长度通常要大的多。所以必须通过一定的程序将 寡核苷酸片段连接起来构建成一个完整的基因。这种将多个寡 核苷酸片段装配成完整基因的过程称为基因的组装 基因组装常用的有两种方法:一种方法是先将寡核苷酸 片段激活,带上5磷酸基团,然后与相应的互补寡核苷酸片段 退火形成带有粘性末端的双链寡核苷酸片段,最后通过连接酶 将这些寡核苷酸片段逐个连接起来成为完整的基因。第二种 方法是将两条具有3端互补的寡核苷酸单链进行退火,所产生 的单链区段可在 Klenow酶的聚合作用下很快得到互补的延伸, 这样就可以得到一段连接好的双链寡核苷酸片段,以此类推便 可得到合成的基因片段。基因的组装过程 通过化学合成的寡核苷酸片段只能达到150-200bp的长度， 而一个基因的长度通常要大的多。所以必须通过一定的程序将 寡核苷酸片段连接起来构建成一个完整的基因。这种将多个寡 核苷酸片段装配成完整基因的过程称为基因的组装。 基因组装常用的有两种方法：一种方法是先将寡核苷酸 片段激活，带上5′磷酸基团，然后与相应的互补寡核苷酸片段 退火形成带有粘性末端的双链寡核苷酸片段，最后通过连接酶 将这些寡核苷酸片段逐个连接起来成为完整的基因。第二种 方法是将两条具有3 ′端互补的寡核苷酸单链进行退火，所产生 的单链区段可在Klenow酶的聚合作用下很快得到互补的延伸， 这样就可以得到一段连接好的双链寡核苷酸片段，以此类推便 可得到合成的基因片段。 1、化学法直接合成基因