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交联而产生固定作用。我们用作固定的为4%甲醛水溶液(9份水加1份浓甲醛液,实际含甲醛4%,俗称10%福尔马 林液 2.↓%中性缓冲甲醛液(10%中性缓冲福尔马林液)对大多数抗原保存较好,是免疫组织化学最常用的固定液, 组织穿透性好,组织收缩小。固定时间以24h以内为宜 固定液配方1:40%甲醛10m1,0.01mol/LpH7.4的PBS90ml。 固定液配方2:40%甲醛10m,蒸馏水8m,磷酸二氢钠(P4·2o)4g,磷酸氢二钠(Naog 优点:①渗透能力强,固定均匀。②收缩小。③能保存脂肪和类脂(冰冻切片法)。④增加组织韧性。⑤有利 于嗜银染色。⑥可固定高尔基体和线粒体。 缺点:①不能沉淀核蛋白及白蛋白。②溶解组织内尿酸盐结晶。③经甲醛固定的陈旧组织较易产生色素沉淀 (去除方法:用 Schridde法:浓氨水1毫升加入75%乙醇200毫升内,切片脱蜡后处理30min,如还有再延长,流水冲 3.80%-95%乙醇为无色液体,可与水在任何比例下混合。它是一种还原剂,很易被氧化成乙醛,再变为醋酸, 所以不能与铬酸、重铬酸钾、锇酸等氧化剂混合。用于固定时以80%~95%的浓度为好。优点:①具有固定、硬化、 脱水等多种作用。②用无水乙醇固定时,其穿透速度很快,宜做糖原固定。缺点:①渗透力较弱,容易造成表面发 硬,较难渗透到组织深部。③能沉淀白蛋白、球蛋白和核蛋白,核蛋白被沉淀后仍能溶于水,故经乙醇固定的组 织,核的着色不良,不利于染色体的固定。④可溶解脂肪及类脂、血红蛋白和损害多种色素,所以要证明细胞内的 脂肪、类脂及色素的存在,不能用乙醇作为固定液 高浓度乙醇固定的组织硬化显著。组织在高浓度乙醇中留置过久,易变脆,也使组织收缩明显,约可缩小原体 积的20%。用7σ%乙醇可较久的保存组织。该液体一般只在没有福尔马林液的情况下,临时单独使用 4.丙酮为极易挥发易燃的无色液体,能与水、醇、氯仿、醚及多种液体混合。丙酮能使蛋白质沉淀,渗透能力 强,但对核固定欠佳,且使组织剧烈收缩。丙酮广泛应用于组织化学中的酶的固定,特别是用于磷酸酶、脂酶以及 氧化酶的固定。其作用基本与乙醇相同,但对糖原无固定作用。 5.醋酸纯醋酸为带刺激味的无色液体,在寒冷时常结成冰状故称冰醋酸,它可以各种比例与水和乙醇相混合, 固定组织常用5%的溶液,它不能沉淀白蛋白、球蛋白,但能沉淀核蛋白,所以对染色质固定很好。醋酸的穿透速度 很快,组织不会硬化,且可防止经乙醇时所引起的高度收缩及硬化。缺点是能使组织膨胀,若单独使用时,只能固 定极短时间,一般都与其他试剂配合使用。高浓度的醋酸会破坏高尔基体和线粒体,故在高尔基体和线粒体制片的 固定中不用醋酸 6. Carry液由冰醋酸l0ml,氯仿3m1.无水乙醇60m配制而成。能固定胞浆和胞核,尤其适宜于染色体等。常 用于糖原和尼氏体的固定,对显示DNA、RNA的效果较好。固定液可防止乙醇的硬化及收缩作用,增加渗透性,特别 适合外膜致密不易透入的组织 7. Bouin液饱和苦味酸水溶液τ5ml,甲醛水溶液25ml,冰醋酸5m配制而成。该液 渗透能力强,固定均匀且收缩较小,染色效果好。由于苦味酸难于溶解,故实验室内应储备一定的饱和苦味酸 水溶液。 Bouin液对绝大多数器官和组织固定良好,固定时间以12-24h为宜,固定后常用70%-80%乙醇洗涤。 8.乙醇、甲醛液(A-F液)由95%或无水乙醇90ml,(浓)甲醛10ml配制而成。此液兼有脱水作用,固定后可直 接入95%乙醇继续脱水。适用于皮下组织肥大细胞的固定。交联而产生固定作用。我们用作固定的为4%甲醛水溶液(9份水加1份浓甲醛液,实际含甲醛4%,俗称10%福尔马 林液)。  2.4%中性缓冲甲醛液(10%中性缓冲福尔马林液) 对大多数抗原保存较好,是免疫组织化学最常用的固定液, 组织穿透性好,组织收缩小。固定时间以24h以内为宜。  固定液配方1:40%甲醛10ml,0.01mol/LpH7.4的PBS 90ml。  固定液配方2:40%甲醛120ml,蒸馏水880ml,磷酸二氢钠(NaH2PO4·H2O)4g,磷酸氢二钠(Na2HPO4) 13g。  优点:①渗透能力强,固定均匀。②收缩小。③能保存脂肪和类脂(冰冻切片法)。④增加组织韧性。⑤有利 于嗜银染色。⑥可固定高尔基体和线粒体。  缺点:①不能沉淀核蛋白及白蛋白。②溶解组织内尿酸盐结晶。③经甲醛固定的陈旧组织较易产生色素沉淀。 (去除方法:用Schridde法:浓氨水1毫升加入75%乙醇200毫升内,切片脱蜡后处理30min,如还有再延长,流水冲 洗)。  3.80%-95%乙醇为无色液体,可与水在任何比例下混合。它是一种还原剂,很易被氧化成乙醛,再变为醋酸, 所以不能与铬酸、重铬酸钾、锇酸等氧化剂混合。用于固定时以80%~95%的浓度为好。优点:①具有固定、硬化、 脱水等多种作用。②用无水乙醇固定时,其穿透速度很快,宜做糖原固定。缺点:①渗透力较弱,容易造成表面发 硬,较难渗透到组织深部。③能沉淀白蛋白、球蛋白和核蛋白,核蛋白被沉淀后仍能溶于水,故经乙醇固定的组 织,核的着色不良,不利于染色体的固定。④可溶解脂肪及类脂、血红蛋白和损害多种色素,所以要证明细胞内的 脂肪、类脂及色素的存在,不能用乙醇作为固定液。  高浓度乙醇固定的组织硬化显著。组织在高浓度乙醇中留置过久,易变脆,也使组织收缩明显,约可缩小原体 积的20%。用70%乙醇可较久的保存组织。该液体一般只在没有福尔马林液的情况下,临时单独使用。  4.丙酮为极易挥发易燃的无色液体,能与水、醇、氯仿、醚及多种液体混合。丙酮能使蛋白质沉淀,渗透能力 强,但对核固定欠佳,且使组织剧烈收缩。丙酮广泛应用于组织化学中的酶的固定,特别是用于磷酸酶、脂酶以及 氧化酶的固定。其作用基本与乙醇相同,但对糖原无固定作用。  5.醋酸纯醋酸为带刺激味的无色液体,在寒冷时常结成冰状故称冰醋酸,它可以各种比例与水和乙醇相混合, 固定组织常用5%的溶液,它不能沉淀白蛋白、球蛋白,但能沉淀核蛋白,所以对染色质固定很好。醋酸的穿透速度 很快,组织不会硬化,且可防止经乙醇时所引起的高度收缩及硬化。缺点是能使组织膨胀,若单独使用时,只能固 定极短时间,一般都与其他试剂配合使用。高浓度的醋酸会破坏高尔基体和线粒体,故在高尔基体和线粒体制片的 固定中不用醋酸。  6. Carroy液由冰醋酸10ml,氯仿30ml.无水乙醇60ml配制而成。能固定胞浆和胞核,尤其适宜于染色体等。常 用于糖原和尼氏体的固定,对显示DNA、RNA的效果较好。固定液可防止乙醇的硬化及收缩作用,增加渗透性,特别 适合外膜致密不易透入的组织。  7. Bouin液饱和苦味酸水溶液75ml,甲醛水溶液25ml,冰醋酸5ml配制而成。该液  渗透能力强,固定均匀且收缩较小,染色效果好。由于苦味酸难于溶解,故实验室内应储备一定的饱和苦味酸 水溶液。Bouin液对绝大多数器官和组织固定良好,固定时间以12-24h为宜,固定后常用70%-80%乙醇洗涤。  8.乙醇、甲醛液(A-F液) 由95%或无水乙醇90ml,(浓)甲醛10ml配制而成。此液兼有脱水作用,固定后可直 接入95%乙醇继续脱水。适用于皮下组织肥大细胞的固定
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