第4期 刘晓璐等：解钾细菌的筛选、鉴定以及高效培养 555· 图3(b)为采用不同氮源培养下GJ07的生长 一般情况下，pH值为6.50~7.50时最适宜细菌的 情况，图中显示，培养2d后，与牛肉膏、硝酸 生长[16.图4(a)给出了初始pH值对GJ07生长 钠、硫酸铵和酵母浸粉相比，蛋白胨为氮源的培养 OD6s0mm值的影响.由图4(a)可以看出，GJ07生长 基中，GJ07生长量较高(OD680nm值可达6.80)，可 OD值随初始pH值的增加先增加然后降低，当初 视为培养GJ07的最佳氮源.因为蛋白胨不仅含有 始pH值为7.00时，GJ07的OD680mm值最大，为 丰富的氨基酸，特别是含硫氨基酸较多，而且含有更 6.77.因此可知GJ07生长效应最佳的初始pH值为 多的细菌生长所需维生素和其他生长因子)，这可能 7.00.陈凯等13)在对筛选出的一株巨大芽孢杆菌培 是其作为GJ07最优氮源的主要原因.作为无机氮源 养时，发现其最适初始pH值为7.50，与本研究得 的硫酸铵和硝酸钠虽也可以支持GJ07的生长，但其 到的结果相近 生长效应明显不佳（两者OD680am值都仅有1.30左 锥形瓶中装液量是影响培养基中溶氧量的重 右)，可能是由于这一类无机氮源中不含GJ07生长所 要因素.一般情况下，装液量越多溶氧量就越少，不 需的各种生长因子，限制了GJ07的生长 利于好氧菌的生长.通常装液量一般不少于锥形瓶 根据上述实验结果，采用蔗糖和蛋白胨作为 体积的1/10，本实验选用锥形瓶体积为250mL,因 GJ07生长的最优碳源和氮源，固定碳源中碳元素 此实验分别装取25、50、75、100和125mL液体， 用量为4.20gL-1,通过改变加入氮源的量研究碳 考察不同装液量对培养基中溶氧量的影响.图4(b) 氨质量比对解钾细菌生长的效应 显示装液量对GJ07生长OD680nm值的影响.从图 图3(c)为采用不同碳氮质量比培养下GJ07的 中可以看出，随装液量的增加，OD68Omm值逐渐降 生长情况.GJ07在碳氮质量比为10：1的条件下生 低，装液量为25mL时，GJ07的OD68oam值最高， 长最好(OD680mm值可达7.00以上)，过高的碳氮质 可达到8.00左右.由此可知GJ07是较为典型的好 量比条件下其生长量明显较低，可见GJ07对氮源 氧生长，对氧的需求量较大，在低装液量(25mL) 的需求量相对较高，但过低的碳氮质量比（⑤：1）会 的条件下表现出明显的生长优势，且随着装液量的 抑制GJ07的快速生长.此结果说明蔗糖和蛋白胨 升高，发酵液中菌体密度逐渐下降.梁锦锋)在摇 为培养GJ07生长的最佳碳源和氨源，最佳碳氮质 瓶实验中也发现较高的装液量会明显限制巨大芽孢 量比为10：1. 杆菌的生长 2.5培养基初始pH值、装液量和培养温度对 GJ07生长的影响 每种微生物都有自己的酶反应体系，因此也都 环境pH值对微生物的生命活动也有较大影响。有各自生长的最适温度7.图4（©）显示的是采用单 10 5 2 5.506.006.507.007.50 8.00 5 50 75 100 125 初始pH值 装液量/mL (a) (b) 10r 25 30 35 温度/℃ (c) 图4初始pH值、装液量和温度对GJ07生长OD6s0mm值的影响 Fig.4 Effects of initial pH values,liquid medium volume and temperature on the growth ODesonm values of GJ07第 期 刘晓璐等 解钾细菌的筛选 、鉴定以及高效培养 · · 图 为采用不 同氮源培养下 的生长 情 况 图中显示 , 培养 后, 与牛 肉膏 、 硝酸 钠 、硫酸钱和酵母浸粉相 比, 蛋白陈 为氮源 的培养 基 中, 生长量较高 。飞 值可达 , 可 视为培养 的最佳氮源 因为蛋 白陈不仅含有 丰富的氨基酸, 特别是含硫氨基酸较多, 而且含有更 多的细菌生长所需维生素和其他生长因子 , 这可能 是其作为 最优氮源的主要原因 作为无机氮源 的硫酸钱和硝酸钠虽也可以支持 的生长, 但其 生长效应明显不佳 两者 、 值都仅有 左 右 , 可能是由于这一类无机氮源中不含 生长所 需的各种生长因子, 限制了 的生长 根据 上述实验结果 , 采用蔗糖和蛋 白陈 作为 生长 的最优碳源和氮源, 固定碳源 中碳元素 用量为 ·一`, 通过改变加入氮源的量研究碳 氮质量比对解钾细菌生长 的效应 图 为采用不同碳氮质量比培养下 的 生长情况 在碳氮质量 比为 的条件下生 长最好 , 值可达 以上 , 过高的碳氮质 量 比条件下其生长量 明显较低 , 可见 对氮源 的需求量相对较高 , 但过低的碳氮质量 比 会 抑制 的快速 生长 此结果说明蔗糖和蛋白陈 为培养 生长 的最佳碳源和氮源, 最佳碳氮质 量比为 · 培 养 基初 始 值 、装液 量和 培 养温 度 对 生长的影响 环境 值对微生物的生命活动也有较大影响 一般情况下 , 值为 时最适宜细菌的 生长 邢 图 给 出了初始 值对 生长 值的影响 由图 《 可 以看 出, 生长 值随初始 值 的增加先增加然后 降低, 当初 始 值为 时 , 的 ,、值最大, 为 因此可知 生长效应最佳的初始 值为 陈凯等 在对筛选出的一株 巨大芽抱杆菌培 养 时, 发现其最适初始 值为 , 与本研究得 到的结果相近 锥形瓶 中装液量是影 响培养基 中溶氧 量的重 要因素一 般情况下 , 装液量越多溶氧量就越少 , 不 利于好氧菌的生长 通常装液量一般不少于锥形瓶 体积的 , 本实验选用锥形瓶体积为 , 因 此实验分别装取 、 、 、 和 液体, 考察不同装液量对培养基 中溶氧量的影响 图 显示装液量对 生长 值 的影响 从图 中可 以看出, 随装液量 的增加, 值逐渐 降 低, 装液量为 时, 的 值最高, 可达到 左右 由此可知 是较为典型的好 氧生长 , 对氧的需求量较大 , 在低装液量 的条件下表现出明显 的生长优势, 且随着装液量的 升高, 发酵液中菌体密度逐渐下降 梁锦锋 在摇 瓶实验中也发现较高的装液量会明显限制 巨大芽抱 杆菌 的生长 每种微生物都有 自己的酶反应体系, 因此也都 有各 自生长 的最适温度日 图 显示 的是采用单 划。工产` 迥 石 ` 石 刀 石 口乏︸﹄ 初始 值 装液量 二 目。艺日户工︸﹃︵ 温度 下 图 初始 值 、装液量和温度对 生长 , 值的影响