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实验三种子中-淀粉酶和B-淀粉酶活性的测定 一、原理 淀粉酶几乎存在于所有的植物中,尤其在禾谷类种子中活性最强。植物种子中存在多 种淀粉酶,如淀粉酶、阝淀粉醇、葡萄糖淀粉酶和R-酶等,其中起主要作用的是a淀粉 酶和-淀粉酶。在种子萌发开始后,-淀粉酶活性随种子萌发天数的增加而急剧增加,是 水解淀粉的起始酶。B淀粉酶与Q淀粉酶联合作用,将淀粉水解为麦芽糖。 a-淀粉酶和-淀粉酶的理化特性不同。a-淀粉酶耐热不耐酸,在70℃加热15min仍能 保持其活性,但当pH<3.6时则饨化。B淀粉酶耐酸不耐热,70℃加热15mi则饨化,但 pH3.3时仍有活力: 本实验采用先测定+)淀粉酶总活性,然后用加热法纯化卜淀粉酶,测定-淀粉酶 活性。淀粉酶水解生成的还原糖可将黄色的3,、.二硝基水扬酸还原为橙红色的氨基化合 物。在一定范围内,还原糖的量与反应液颜色的深浅成比例关系,利用比色法可测出麦芽 糖的含量。以麦芽糖的毫克数表示淀粉醇活性的大小。 二、目的要求 1.掌握禾谷类作物种子~淀粉酶和B-淀粉酶活性测定的原理。 2。掌握禾禾谷类种子萌发过程中淀粉降解的主要途径。 三、仪器设备 (1)分光光度计 (2)离心机 (3)研体 (4)量简50mL (5)试管10mL×5 (6)具塞刻度试管25mL×10 (7)移液管5mL×2,1mL×2:2mL×3 (8)水浴锅 (9)离心机 (10)分析天平
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