混合液、0.85%生理盐水、蒸馏水、Giemsal原液、Giemsa稀释液、1/15mo /L磷酸缓冲液。 4、试剂配制置 1)0.125%胰蛋白酶溶液：称取1g胰蛋白酶溶于40ml无菌生理盐水中， 制成2.5%胰蛋白酶原液并保存于冰箱的冷冻室。使用时取原液2.5ml加生理 盐水至50ml,配成0.125%的工作液。 2)0.85%NaCI溶液：称取NaCI8.5g溶于1000ml蒸馏水。 3)0.02%EDTA溶液：称取0.2 g EDTA(乙二胺四乙酸二钠)溶于1000ml 生理盐水中。 4)溶液：5%NaHCO,溶液：称取5 g NaHCO溶于100ml蒸馏水中。 5)1/15mo/L磷酸缓冲液：称取NazHPO4·12H011.8g或5.92g NazHPO.4.2H0),KHP0,4.50g溶于1000ml蒸馏水中，混匀。 四、实验内容与方法 (一)人类染色体G显带标本制备 1、胰蛋白酶法 ①将常规制备的人染色体玻片标本（未染色的白片）置70℃烤箱中处理 2小时，然后转入37℃培养箱中备用，一般在第3~7天进行显带。 ②取2.5%的胰蛋白酶原液2.5ml加生理盐水至50ml,配成0.125%的工作 液并用NaHCO,调pH值至7左右。 ③将配好的胰蛋白酶工作液放入37℃水浴箱中预热。 ④将玻片标本浸入胰蛋白酶中，不断摆动使胰蛋白酶的作用均匀，处理 1~2分钟（精确的时间自行摸索）。 ⑤立即取出玻片，放入生理盐水中漂洗两次。 ⑥染色。将标本浸入37℃预温的Giemsa染液(1：l0的Giemsa原液和 pH6.8的磷酸缓冲液)中染色10分钟左右。 ⑦自来水冲洗（用细水小心冲洗）、晾干。 ⑧镜检显带效果。在低倍镜下选择分散良好的长度适中的分裂相转换油 镜观察，若染色体未出现带纹，则为显带不足：若染色体边缘发毛为显带过 头，此时应根据具体情况增减胰蛋白酶处理时间重新处理一张标本。 2、EDTA一胰蛋白酶法 ①取25ml生理盐水和25m10.02%的EDTA溶液倒入立式染色缸中混匀。 ②取2.5%的胰蛋白酶原液1ml加入到上液中混匀，并用5%NaHCO,调 1515 混合液、0.85％生理盐水、蒸馏水、Giemsa原液、Giemsa稀释液、1／15mol ／L磷酸缓冲液。 4、试剂配制置 1）0.125%胰蛋白酶溶液：称取1g胰蛋白酶溶于40ml无菌生理盐水中， 制成2.5%胰蛋白酶原液并保存于冰箱的冷冻室。使用时取原液2.5ml加生理 盐水至50ml，配成0.125%的工作液。 2）0.85%NaCl溶液：称取NaCl8.5g溶于1000ml蒸馏水。 3）0.02%EDTA溶液：称取0.2g EDTA（乙二胺四乙酸二钠）溶于1000ml 生理盐水中。 4）溶液:5%NaHCO3溶液:称取5g NaHCO3溶于100ml蒸馏水中。 5 ） 1/15mol/L 磷酸缓冲液：称取 Na2HPO4 ． 12H2O11.8g 或 5.92g Na2HPO4 ．2H2O），KH2PO4 4.50g溶于1000ml蒸馏水中，混匀。 四、实验内容与方法 （一）人类染色体G显带标本制备 1、胰蛋白酶法 ①将常规制备的人染色体玻片标本（未染色的白片）置70℃烤箱中处理 2小时，然后转入37℃培养箱中备用，一般在第3～7天进行显带。 ②取2.5％的胰蛋白酶原液2.5ml加生理盐水至50ml，配成0.125％的工作 液并用NaHCO3调pH值至7左右。 ③将配好的胰蛋白酶工作液放入37℃水浴箱中预热。 ④将玻片标本浸入胰蛋白酶中，不断摆动使胰蛋白酶的作用均匀，处理 1～2分钟（精确的时间自行摸索）。 ⑤立即取出玻片，放入生理盐水中漂洗两次。 ⑥染色。将标本浸入37℃预温的Giemsa染液（1:10的Giemsa原液和 pH6.8的磷酸缓冲液）中染色10分钟左右。 ⑦自来水冲洗（用细水小心冲洗）、晾干。 ⑧镜检显带效果。在低倍镜下选择分散良好的长度适中的分裂相转换油 镜观察，若染色体未出现带纹，则为显带不足；若染色体边缘发毛为显带过 头，此时应根据具体情况增减胰蛋白酶处理时间重新处理一张标本。 2、EDTA一胰蛋白酶法 ①取25ml生理盐水和25ml0.02％的EDTA溶液倒入立式染色缸中混匀。 ②取2.5％的胰蛋白酶原液1ml加入到上液中混匀，并用5％NaHCO3调