实验四人类染色体G显带技术及G带核型分析 一、实验目的 1、初步掌握染色体G带标本的制备技术。 2、了解人类染色体的G显带的带型特征。 二、实验原理 人们将用各种不同的方法，以及用不同的染料处理染色体标本后，使每 条染色体上出现明暗相间，或深浅不同带纹的技术称为显带技术(banding technique)。本世纪70年代以来，显带技术得到了很大发展，且在众多的显 带技术中(Q带、G带、C带、R带、T带)，G带是目前被广泛应用的一种 带型。因为它主要是被Giemsa染料染色后而显带，故称之为G显带技术，其 所显示的带纹分布在整个染色体上。 研究发现，人染色体标本经胰蛋白酶、NaOH、柠檬酸盐或尿素等试剂 处理后，再用Giemsa染色，可使每条染色体上显示出深浅交替的横纹，这就 是染色体的G带。每条染色体都有其较为恒定的带纹特征，所以G显带后， 可以较为准确的识别每条染色体，并可发现染色体上较细微的结构畸变。关 于G显带的机理目前有多种说法，例如，Lee等(I973)认为染色体上与DNA 结合疏松的组蛋白易被胰蛋白酶分解掉，染色后这些区段成为浅带，而那些 组蛋白和DNA结合牢固的区段可被染成深带。有人认为，染色体显带现象 是染色体本身存在着带的结构。比如用相差显微镜观察未染色的染色体时， 就能直接观察到带的存在。用特殊方法处理后，再用染料染色，则带更加清 楚，随显带方法不同，显出来的带特点也不一样，说明带的出现又与染料特 异结合有关。一般认为，易着色的阳性带为含有AT多的染色体节段，相反， 含GC多的染色体段则不易着色。总的来说，G显带的机理还未搞清。 三、实验用品 1、材料：常规方法制备的中期人类染色体标本（标本片龄不超过30天 为宜)。 2、器材：显微镜、恒温培养箱、烤箱、恒温水浴箱、冰箱、染色缸、 小镊子、玻片架、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸。 3、试剂：0.125%胰蛋白酶溶液、0.02%EDTA溶液、胰蛋白酶一EDTA 14 14 实验四 人类染色体 G 显带技术及 G 带核型分析 一、实验目的 1、初步掌握染色体G带标本的制备技术。 2、了解人类染色体的G显带的带型特征。 二、实验原理 人们将用各种不同的方法，以及用不同的染料处理染色体标本后，使每 条染色体上出现明暗相间，或深浅不同带纹的技术称为显带技术（banding technique）。本世纪70年代以来，显带技术得到了很大发展，且在众多的显 带技术中（Q带、G带、C带、R带、T带），G带是目前被广泛应用的一种 带型。因为它主要是被Giemsa染料染色后而显带，故称之为G显带技术，其 所显示的带纹分布在整个染色体上。 研究发现，人染色体标本经胰蛋白酶、Na0H、柠檬酸盐或尿素等试剂 处理后，再用Giemsa染色，可使每条染色体上显示出深浅交替的横纹，这就 是染色体的G带。每条染色体都有其较为恒定的带纹特征，所以G显带后， 可以较为准确的识别每条染色体，并可发现染色体上较细微的结构畸变。关 于G显带的机理目前有多种说法，例如，Lee等（1973）认为染色体上与DNA 结合疏松的组蛋白易被胰蛋白酶分解掉，染色后这些区段成为浅带，而那些 组蛋白和DNA结合牢固的区段可被染成深带。有人认为，染色体显带现象 是染色体本身存在着带的结构。比如用相差显微镜观察未染色的染色体时， 就能直接观察到带的存在。用特殊方法处理后，再用染料染色，则带更加清 楚，随显带方法不同，显出来的带特点也不一样，说明带的出现又与染料特 异结合有关。一般认为，易着色的阳性带为含有AT多的染色体节段，相反， 含GC多的染色体段则不易着色。总的来说，G显带的机理还未搞清。 三、实验用品 1、材料：常规方法制备的中期人类染色体标本（标本片龄不超过30天 为宜）。 2、器材：显微镜、恒温培养箱、烤箱、恒温水浴箱、冰箱、染色缸、 小镊子、玻片架、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸。 3、试剂：0.125％胰蛋白酶溶液、0.02％EDTA溶液、胰蛋白酶一EDTA