优良菌种标准:(不同培养基状态有些差异) (1)无杂:无杂菌污染 (2)足够菌丝量 (3)菌丝状态正常(快、白、浓、壮)洁白、均匀、弹性、无离壁、黄水 (4)菌令适中:(菌种级别、接菌培养时间、保藏条件、培养基种类) 级菌:斜面培养基,最适菌令:20-30天,0-4℃保藏:2-3个月 二级菌:谷粒培养基,最适菌令:20-30天,常温保藏,1个月 木屑培养基,最适菌令:50—60天,常温保藏,2个月 三级菌:木屑培养基,最适菌令:60-70天,常温保藏,2-3个月 3、分级:一、二、三级(母种→原种→栽培种) 级:斜面试管 二级:固体培养基、玻璃瓶等容器、一级菌扩繁得来的 三级:固体培养基、塑料袋等容器、二级菌扩繁得来的 区别:无本质区别,其区别仅在于:纯度不一样、菌种量不一样。 第二节基本设施 房 根据流程设计、布局 1、配料、操作:2、培养基灭菌:3、接菌:4、培养;5、贮藏 设备: 1、手工操作( 级只能用手工操作) (1)、灭菌器(高压、常压) (2)、接菌器、接菌箱 (3)、恒温箱、恒温室 2、机械化生产(选料、拌料、装瓶、(装袋)、灭菌、接菌,都有机械))。 第三节纯种分离 (孢子分离、组织分离、基内菌丝分离法) 、孢子分离法(不常用的方法) 1、多孢分离 2、单孢分离 组织分离法(首选方法) 、基内菌丝分离法(没办法的办法) 第四节菌种生产(制种技术) 母种制作(一级菌种) 1、培养基制备 配方:PDA土豆200g:G20g;琼脂20g;水1000m1定容 加富PDA:土豆200g:G20g:KH2PO3g:MgSO2g:定容 制备:土豆→洗净、去皮、切片→煮沸10分钟→过滤→加琼脂→煮沸10-15分钟→加糖→定容→分 装试管(10-15ml/支,注意:不粘管内壁口)→封口(非脱脂棉)→加防潮盖 2、灭菌:高压蒸汽灭菌,压力1.2-1.3Kg/cm2,时间30分钟 注意:升压时排净冷气,降压时不可过快 3、摆斜面:基本到底(温度降到60℃以下时摆) 4、接菌:无菌操作,场所:无菌室、超净台、接菌箱:12 优良菌种标准：（不同培养基状态有些差异） （1）无杂：无杂菌污染 （2）足够菌丝量： （3）菌丝状态正常（快、白、浓、壮）洁白、均匀、弹性、无离壁、黄水 （4）菌令适中：（菌种级别、接菌培养时间、保藏条件、培养基种类） 一级菌：斜面培养基，最适菌令：20—30 天，0—4℃保藏：2—3 个月 二级菌：谷粒培养基，最适菌令：20—30 天，常温保藏，1 个月 木屑培养基，最适菌令：50—60 天，常温保藏，2 个月 三级菌：木屑培养基，最适菌令：60—70 天，常温保藏，2—3 个月 3、分级：一、二、三级 ( 母种→原种→栽培种) 一级：斜面试管 二级：固体培养基、玻璃瓶等容器、一级菌扩繁得来的 三级：固体培养基、塑料袋等容器、二级菌扩繁得来的 区别：无本质区别，其区别仅在于：纯度不一样、菌种量不一样。 第二节 基本设施 一、厂房： 根据流程设计、布局 1、 配料、操作；2、培养基灭菌； 3、接菌；4、培养；5、贮藏 二、设备： 1、手工操作（一、二级只能用手工操作） （1）、灭菌器（高压、常压） （2）、接菌器、接菌箱 （3）、恒温箱、恒温室 2、机械化生产（选料、拌料、装瓶、（装袋）、灭菌、接菌，都有机械））。 第三节 纯种分离 （ 孢子分离、组织分离、基内菌丝分离法） 一、孢子分离法（不常用的方法） 1、多孢分离 2、单孢分离 二、组织分离法（首选方法） 三、基内菌丝分离法（没办法的办法） 第四节 菌种生产（制种技术） 一、母种制作（一级菌种） 1、培养基制备 配方：PDA 土豆 200g；G 20g；琼脂 20g；水 1000ml 定容 加富 PDA：土豆 200g；G 20g；KH2PO43g；MgSO42g；定容 制备：土豆→洗净、去皮、切片→煮沸 10 分钟→过滤→加琼脂→煮沸 10—15 分钟→加糖→定容→分 装试管（10—15ml/支，注意：不粘管内壁口）→封口（非脱脂棉）→加防潮盖 2、 灭菌：高压蒸汽灭菌，压力 1.2—1.3Kg/cm2，时间 30 分钟。 注意：升压时排净冷气，降压时不可过快 3、摆斜面：基本到底（温度降到 60℃以下时摆） 4、接菌：无菌操作，场所：无菌室、超净台、接菌箱；