3.流动相在离子交换色谱中，流动相的性质亦是很重要的，流动相的pH、离子强度、 缓冲液的变化对保留值K'和分离系数a有很大影响。在实际使用中.大部采用一定的pH和 一定浓度的缓冲液，并严格控制其离子强度。 流动相的H值对弱酸性和弱碱性离子交换剂的交换容量有影响，还对弱酸或弱碱混合 物的分离也有影响、因为它们如果是以不解离的分子形式存在，将无保留地通过离子交换剂。 只有先离解为离子，才可进行离子交换而被分离：而流动相的pH值决定了它们的离子浓度， 所以流动相pH值变化、引起K'的变化。在阳离子交换色谱中经常使用的缓冲液有醋酸、甲 酸的御、钠缓冲液：在阴离子交换色谱中常用阴离子缓冲液如氨、毗啶等来控制H 五、在农药分析中的应用 前已述及，在农药制剂分析中，高效液相色谱法发展很快，除了氨基甲酸酯类农药外， 热稳定性差的和分析前需要进行衍生化处理，才能使用气相色谱法的农药，都可使用此法。 与农药残留分析不同， 使用高效液相色谱法分析农药制剂的特点是样本处理比较简便，液 样本通常稀释后即可进样，固体农药制剂则需用适当的溶剂提取，过滤后即可进样。 如果 要净化和浓缩，可以使用塑料2×0.5cm指形层析柱来净化和提取农药。在我国己商品化的 指形层析柱有硅胶和弗罗里硅土柱，用来分离和提取溶于石油醚类溶剂中的稍带极性的农 药，还有C:小柱，可以分离、提取水和甲醇中的农药。 农药常量分析和残留分析是有区别的，残留分析要求灵敏度高和能检出其类似结构的有 毒代谢物，但准确 变要求不 高， 常量分析时样品 有效成分含量较高， 方法的灵敏度要 不高，但方法的准确度和精密度必须达到要求，而且要求样本负载量在较大范围内都有响应 因此在用液相色谱法测定农药时，必须具有以下最基本的设备：一个带有梯度洗脱的泵系统、 可变波长的紫外检测器、柱加热器和定量进样环装置。可连续改变波长的紫外检测器是很有 用的，加带有停留扫措装置可以洗择最大吸收被长，测定时胡据需要洗择合活的色渔柱和 流动相以达到最好分离。 (一)分离类型的选择 在进行液相色谱分析前.首先要仔细研究农药的特性及该项分离分析的目的，以选择最 合适的方法、任何一种分离类型都不是万能的，它们各适用于一定的分离对象，可根据农药 的分子量、极性、溶解度、分子结构、解离情况等特性。选择分离类型，参见图5一14。 起些 正都流液分配色清 、反相液液分配色许 非投性液阴吸附色语 农药分子量<2000 溶于水 非离子反湘涟液分配色谱 图5-14分离类瓶的选搛 农药的分子量一般小于2000，在选择高效液相色谱的分离类型时，首先要了解农药的 溶解度，将它们分为溶于水的和不溶于水而溶于有机溶剂两类。不溶于水、溶于有机溶剂的 非极性农药，可以使用液固吸附色谱，菊酯类农药如溴氰菊酯、氯氰菊酯都可使用液固吸附 色谱，尤其是对各异构体的分离，如氯氰菊酯的测定是使用5m的硅胶柱， 以0.5%v/ 乙酸乙酯/异辛烷作为移动相，柱温50℃，以苯甲酸甲酯为内标，各异构体和内标均得到 很好地分离，在注温为50士20℃时，其出峰时间见图5一15。3．流动相 在离子交换色谱中，流动相的性质亦是很重要的，流动相的 pH、离子强度、 缓冲液的变化对保留值 K’和分离系数 a 有很大影响。在实际使用中．大部采用一定的 pH 和 —定浓度的缓冲液，并严格控制其离子强度。 流动相的 pH 值对弱酸性和弱碱性离子交换剂的交换容量有影响，还对弱酸或弱碱混合 物的分离也有影响、因为它们如果是以不解离的分子形式存在，将无保留地通过离子交换剂。 只有先离解为离子，才可进行离子交换而被分离；而流动相的 pH 值决定了它们的离子浓度， 所以流动相 pH 值变化、引起 K’的变化。在阳离子交换色谱中经常使用的缓冲液有醋酸、甲 酸的钾、钠缓冲液；在阴离子交换色谱中常用阴离子缓冲液如氨、吡啶等来控制 pH。 五、在农药分析中的应用 前已述及，在农药制剂分析中，高效液相色谱法发展很快，除了氨基甲酸酯类农药外， 热稳定性差的和分析前需要进行衍生化处理，才能使用气相色谱法的农药，都可使用此法。 与农药残留分析不同，使用高效液相色谱法分析农药制剂的特点是样本处理比较简便，液体 样本通常稀释后即可进样，固体农药制剂则需用适当的溶剂提取，过滤后即可进样。如果需 要净化和浓缩，可以使用塑料 2×0.5cm 指形层析柱来净化和提取农药。在我国已商品化的 指形层析柱有硅胶和弗罗里硅土柱，用来分离和提取溶于石油醚类溶剂中的稍带极性的农 药，还有 C18 小柱，可以分离、提取水和甲醇中的农药。 农药常量分析和残留分析是有区别的，残留分析要求灵敏度高和能检出其类似结构的有 毒代谢物，但准确度要求不高，常量分析时样品中有效成分含量较高，对方法的灵敏度要求 不高，但方法的准确度和精密度必须达到要求，而且要求样本负载量在较大范围内都有响应。 因此在用液相色谱法测定农药时，必须具有以下最基本的设备：一个带有梯度洗脱的泵系统、 可变波长的紫外检测器、柱加热器和定量进样环装置。可连续改变波长的紫外检测器是很有 用的，如带有停留扫描装置可以选择最大吸收波长，测定时可根据需要选择合适的色谱柱和 流动相以达到最好分离。 (一)分离类型的选择 在进行液相色谱分析前．首先要仔细研究农药的特性及该项分离分析的目的，以选择最 合适的方法、任何一种分离类型都不是万能的，它们各适用于一定的分离对象，可根据农药 的分子量、极性、溶解度、分子结构、解离情况等特性。选择分离类型，参见图 5—14。 农药的分子量一般小于 2000，在选择高效液相色谱的分离类型时，首先要了解农药的 溶解度，将它们分为溶于水的和不溶于水而溶于有机溶剂两类。不溶于水、溶于有机溶剂的 非极性农药，可以使用液固吸附色谱，菊酯类农药如溴氰菊酯、氯氰菊酯都可使用液固吸附 色谱，尤其是对各异构体的分离，如氯氰菊酯的测定是使用 5μm 的硅胶柱，以 0.5％ v／v 乙酸乙酯／异辛烷作为移动相，柱温 50℃，以苯甲酸甲酯为内标，各异构体和内标均得到 很好地分离，在注温为 50 土 20℃时，其出峰时间见图 5—15