1.选择在加入Bdu之后经过两个复制周期,姐妹染色单体分化着色清晰, 染色体分散良好,长短合适和染色数目完整的中期分裂,进行观察分析。 2.SCE交换次数判定:染色体某臂端部交换算1次交换,臂间交换算2次; 着丝粒处发生交换(需排除染色体在此发生扭曲)计一次。 3.每个标本分析30-50个中期分裂相。 4.SCE率计算:SCE率=累计互换数观察细胞数=SCE细胞 第四节小鼠骨髓嗜多染红细胞微核检测 微核是游离于细胞质中的核物质小体,一般为主核的1/3~1/4。微核是染色 体畸变的一种特殊表现形式,是细胞分裂后期滞留的染色体断片或整条染色体在 子代细胞分裂间期的细胞质中形成的游离团块物。由于染色体受化学诱变剂和辐 射损伤而断裂成一些无着丝粒的染色体断片或纺锤体受到某些毒物作用而损伤, 当细胞进入分裂后期时,染色体不受纺锤丝牵引而滞留在赤道板附近。在末期以 后,单独形成一个或几个规则的次核,包含在子细胞的胞质内,由于比主核小得 多,故称微核。微核同主核一样,是由DNA物质所组成。现已证实,微核率同 外界作用因子的剂量呈线性正比关系。因此,微核检测技术已广泛应用在辐射防 护、损伤,化学诱变剂研究和新药、保健食品的毒理实验中。 微核检测技术 微核的产生与染色体和DNA损伤有较大关系,常将微核的检出率作为DNA 损伤的一种指标 微核试验( Micronucleus test,MNT)方法可分成两大类,一类是从外周血中 分离淋巴细胞,常规涂片即可,称直接法。该法制作简便、快速,适用于大面积 的人群普査,但检出率低,敏感性较差,在准确反映染色体损伤方面一直有质疑 另一类是培养法,即将细胞经体外培养后再制片,该法检岀率髙,敏感性较强, 而且制备的标本胞浆完整、染色清晰。 微核的形成需要经过一次细胞分裂。有丝分裂阻断法微核检测技术是利用 定浓度的细胞松弛素B阻断淋巴细胞细胞质的分裂而不影响细胞核的分裂,即在 淋巴细胞培养过程中加入细胞松弛素B,使经过一次分裂的淋巴细胞呈双核,选 择这部分细胞进行微核计数而提高了实验的敏感性。同时也成为检测致突变、致9 1．选择在加入 Brdu 之后经过两个复制周期，姐妹染色单体分化着色清晰， 染色体分散良好，长短合适和染色数目完整的中期分裂，进行观察分析。 2．SCE 交换次数判定：染色体某臂端部交换算 1 次交换，臂间交换算 2 次； 着丝粒处发生交换（需排除染色体在此发生扭曲）计一次。 3．每个标本分析 30~50 个中期分裂相。 4．SCE 率计算：SCE 率=累计互换数/观察细胞数=SCE/细胞 第四节 小鼠骨髓嗜多染红细胞微核检测 微核是游离于细胞质中的核物质小体，一般为主核的 1/3～1/4。微核是染色 体畸变的一种特殊表现形式，是细胞分裂后期滞留的染色体断片或整条染色体在 子代细胞分裂间期的细胞质中形成的游离团块物。由于染色体受化学诱变剂和辐 射损伤而断裂成一些无着丝粒的染色体断片或纺锤体受到某些毒物作用而损伤， 当细胞进入分裂后期时，染色体不受纺锤丝牵引而滞留在赤道板附近。在末期以 后，单独形成一个或几个规则的次核，包含在子细胞的胞质内，由于比主核小得 多，故称微核。微核同主核一样，是由 DNA 物质所组成。现已证实，微核率同 外界作用因子的剂量呈线性正比关系。因此，微核检测技术已广泛应用在辐射防 护、损伤，化学诱变剂研究和新药、保健食品的毒理实验中。 一、微核检测技术 微核的产生与染色体和 DNA 损伤有较大关系，常将微核的检出率作为 DNA 损伤的一种指标。 微核试验（Micronucleus test，MNT）方法可分成两大类，一类是从外周血中 分离淋巴细胞，常规涂片即可，称直接法。该法制作简便、快速，适用于大面积 的人群普查，但检出率低，敏感性较差，在准确反映染色体损伤方面一直有质疑。 另一类是培养法，即将细胞经体外培养后再制片，该法检出率高，敏感性较强， 而且制备的标本胞浆完整、染色清晰。 微核的形成需要经过一次细胞分裂。有丝分裂阻断法微核检测技术是利用一 定浓度的细胞松弛素 B 阻断淋巴细胞细胞质的分裂而不影响细胞核的分裂，即在 淋巴细胞培养过程中加入细胞松弛素 B，使经过一次分裂的淋巴细胞呈双核，选 择这部分细胞进行微核计数而提高了实验的敏感性。同时也成为检测致突变、致