2、形态计量术形态计量术(morphometry)是运用数学和统计学原理对组织和细胞进行 二维和三维的形态测量研究，如细胞及其微细结构成分的数量、体积、表面积、周长等的相对 和绝对值的测量，其中三维立体结构的研究又称体视学(stereology)）。机体组织的光镜结构 计量已有不少有意义的资料，如人和动物的肺泡数量和表面积，肾小体的数量和体积比，肝细 胞的体积和数量，胰岛的数量及各类细胞的数量比，腺垂体各种内分泌细胞的数量比等。通过 组织切片或照片（光镜和电镜）平面图像的测量，推算其立体结构数值，传统方法是将测试系 统（点、线、方格等）投影或覆盖在切片上或照片上，把若干样品的平面测量数据按数学公式 推算出其立体数值。目前已广泛应用图像分析仪(image analyzer)进行形态计量研究，该仪 器也是光学、电子学和计算机高技术产品，它是将切片或照片图像通过摄像机显示于监示器屏 幕上，并根据不同结构的颜色深浅（灰度）及各像点的大小位置，快速准确地得出所需的各种 形态数据。组织化学和免疫组织化学染色标本，也可应用图像分析仪测定其光密度值，进行定 量分析。 3、流式细胞术流式细胞术(flow cytometry,.FCM)是近年建立的细胞分类和定量研究技 术，它是应用流式细胞仪（或称荧光激活细胞分类器，fluroescent activated cell sorter)对单 个细胞生物化学和生物物理特性进行快速定量测定的。工作原理是先分离被检细胞制成悬液， 并作荧光染色或标记，使单细胞液流快速通过该仪器的激光器照射分析区，被检细胞产生的不 同荧光信号转变为电脉冲，分别输入计算机内贮存，并显示于示波器屏幕上，即可获得该细胞 群体中不同类型细胞的有关数据，如不同细胞的数量、荧光强度以及细胞体积、表面积和内部 结构等参数；还可使细胞附有不同电荷，分类收集各种细胞，该技术的特点是速度快，精确性 高，灵敏度大，已成为一种重要手段广泛用于细胞动力学、遗传学、免疫学、肿瘤学等的研 究。如细胞DNA,RNA或某种蛋白质的含量分析，单个染色体DNA含量及分选，淋巴细胞膜 抗原或受体的分析及细胞亚群分选，杂交细胞等的分选等，也用于肿瘤临床诊断及疗效和预后 的分析等。 (八)电子显微镜术 I、透射电镜术透射电镜(transmission electron microscope,.TEM)是以电子束穿透样品 (组织的超薄切片)，经聚合放大后，显像于荧光屏上进行观察和摄片的。电镜的放大倍数的 分辨率比光镜大得多，放大倍数为几万至几十万倍，分辨率可达0.2m。标本制备较光镜的更 严格，新鲜组织切，成小块(Imm3),用戊二醛，多聚甲醛、四氧化锇等固定，树脂包埋，以超 薄切片机切成厚50~80m的超薄切片，经醋酸铀和柠檬酸铅等重金属电子染色后，置于电镜 下观察，标本在荧光屏上呈黑白反差的结构影像。被重金属浸染呈黑色的结构，称电子密度高 (electron--dense);反之，浅染的部分称电子密度低(electron-lucent),这种染色称正染色 (positive staining)。若被染结构着色浅淡，而其周围部分染成黑，是称为负染色(negative stainning)。透射电镜的电子枪加速电压50~l0okV,电子束穿透力低，近年制成加速电压 500kV以上的超高压电镜，电子束穿透力很强，可观察0.5~10μm厚的切片，可观察细胞内骨 架等的立体超微结构。应用电镜观察细胞化学染色标本，称电镜细胞化学术(electron 2、形态计量术 形态计量术（morphometry）是运用数学和统计学原理对组织和细胞进行 二维和三维的形态测量研究，如细胞及其微细结构成分的数量、体积、表面积、周长等的相对 和绝对值的测量，其中三维立体结构的研究又称体视学（stereology）。机体组织的光镜结构 计量已有不少有意义的资料，如人和动物的肺泡数量和表面积，肾小体的数量和体积比，肝细 胞的体积和数量，胰岛的数量及各类细胞的数量比，腺垂体各种内分泌细胞的数量比等。通过 组织切片或照片（光镜和电镜）平面图像的测量，推算其立体结构数值，传统方法是将测试系 统（点、线、方格等）投影或覆盖在切片上或照片上，把若干样品的平面测量数据按数学公式 推算出其立体数值。目前已广泛应用图像分析仪（image analyzer）进行形态计量研究，该仪 器也是光学、电子学和计算机高技术产品，它是将切片或照片图像通过摄像机显示于监示器屏 幕上，并根据不同结构的颜色深浅（灰度）及各像点的大小位置，快速准确地得出所需的各种 形态数据。组织化学和免疫组织化学染色标本，也可应用图像分析仪测定其光密度值，进行定 量分析。 3、流式细胞术 流式细胞术（flow cytometry,FCM）是近年建立的细胞分类和定量研究技 术，它是应用流式细胞仪（或称荧光激活细胞分类器，fluroescent activated cell sorter）对单 个细胞生物化学和生物物理特性进行快速定量测定的。工作原理是先分离被检细胞制成悬液， 并作荧光染色或标记，使单细胞液流快速通过该仪器的激光器照射分析区，被检细胞产生的不 同荧光信号转变为电脉冲，分别输入计算机内贮存，并显示于示波器屏幕上，即可获得该细胞 群体中不同类型细胞的有关数据，如不同细胞的数量、荧光强度以及细胞体积、表面积和内部 结构等参数；还可使细胞附有不同电荷，分类收集各种细胞，该技术的特点是速度快，精确性 高，灵敏度大，已成为一种重要手段广泛用于细胞动力学、遗传学、免疫学、肿瘤学等的研 究。如细胞DNA，RNA或某种蛋白质的含量分析，单个染色体DNA含量及分选，淋巴细胞膜 抗原或受体的分析及细胞亚群分选，杂交细胞等的分选等，也用于肿瘤临床诊断及疗效和预后 的分析等。 （八）电子显微镜术 1、透射电镜术 透射电镜（transmission electron microscope,TEM）是以电子束穿透样品 （组织的超薄切片），经聚合放大后，显像于荧光屏上进行观察和摄片的。电镜的放大倍数的 分辨率比光镜大得多，放大倍数为几万至几十万倍，分辨率可达0.2nm。标本制备较光镜的更 严格，新鲜组织切成小块（lmm 3），用戊二醛，多聚甲醛、四氧化锇等固定，树脂包埋，以超 薄切片机切成厚50～80nm的超薄切片，经醋酸铀和柠檬酸铅等重金属电子染色后，置于电镜 下观察，标本在荧光屏上呈黑白反差的结构影像。被重金属浸染呈黑色的结构，称电子密度高 （electron-dense）；反之，浅染的部分称电子密度低（electron-lucent）,这种染色称正染色 （positive staining）。若被染结构着色浅淡，而其周围部分染成黑,是称为负染色（negative stainning）。透射电镜的电子枪加速电压50～100kV，电子束穿透力低，近年制成加速电压 500kV以上的超高压电镜，电子束穿透力很强，可观察0.5～10μm厚的切片，可观察细胞内骨 架 等 的 立 体 超 微 结 构 。 应 用 电 镜 观 察 细 胞 化 学 染 色 标 本 ， 称 电 镜 细 胞 化 学 术 （ electron