酚蓝示踪，电泳（初始电流15mA,稳流25mA),取出胶片，用考马斯亮蓝R2so溶液染色， 脱色至谱带清晰。 结果：苦杏仁有3个特征性主谱带，与桃仁有明显的区别。 2)蕲蛇、乌梢蛇及金钱白花蛇供试品溶液的制备：分取供试品粉末各约1.0g,加 入生理盐水4mL,研磨成匀浆，离心l5min(4000rmin),取上清液，加入1倍量丙酮，离 心15min(4000r/min),加入1/2体积的40%蔗糖液，备用。 电泳方法：吸取上述溶液各20L,分别点样于同一聚丙烯酰胺凝胶胶片上，用溴酚 蓝示踪。电泳（分离胶浓度为7.5%，浓缩胶浓度为2.5%：初始电流10mA,稳流15mA) 取出胶片，放入7%醋酸溶液中固定10min,用0.2%考马斯亮蓝R250染色30min,取出，用 蒸馏水洗，再放入含20%甲醇和7%醋酸的脱色液中，脱色30mi。 结果：蕲蛇有7条谱带，一级带2条、二级带3条、三级带2条。乌梢蛇有一级带3 条，二级带和三级带各2条，扩散带1条。金钱白花蛇有一级带2条，二级带4条，三级带 2条。 3)小茴香供试品溶液的制备：取小茴香粉末约1.0g,加入25%浓缩胶缓冲液1mL, 超声提取30min,离心20min(3500rmin),吸取上清液，加入40%蔗糖溶液(1：1)，混 匀备用。 易混药材供试溶液的制备：取莳萝子同上法制备。 电泳方法：吸取上述2种溶液各20L,分别点样于同一聚丙烯酰胺凝胶胶片上，用 溴酚蓝示踪，电泳（初始电流15mA,稳流25mA),取出胶片，用考马斯亮蓝R250溶液染 色，脱色至谱带清晰。 结果：供试品与易混品比较，具有4个特征性谱带。 要点及难点解答 (1)经高温或炮制处理的药材，很可能会因蛋白质的失活而难以得到理想的电泳图谱。 (2)新配制的过硫酸铵溶液在4℃下可保存1周。 (3)加蔗糖溶液增加提取液的密度，以便于样品液沉于样品槽底部。 (4)琼脂层既可导电，又具有密封作用。 (5)一定要将水层彻底除去，且注意不能破坏分离胶的水平表面。65 酚蓝示踪，电泳（初始电流 15mA，稳流 25mA），取出胶片，用考马斯亮蓝 R250 溶液染色， 脱色至谱带清晰。 结果：苦杏仁有 3 个特征性主谱带，与桃仁有明显的区别。 2）蕲蛇、乌梢蛇及金钱白花蛇 供试品溶液的制备：分取供试品粉末各约 1.0g，加 入生理盐水 4mL，研磨成匀浆，离心 15min（4 000r/min），取上清液，加入 1 倍量丙酮，离 心 15min（4 000r/min），加入 1/2 体积的 40%蔗糖液，备用。 电泳方法：吸取上述溶液各 20L，分别点样于同一聚丙烯酰胺凝胶胶片上，用溴酚 蓝示踪。电泳（分离胶浓度为 7.5%，浓缩胶浓度为 2.5%；初始电流 10mA，稳流 15mA） 取出胶片，放入 7%醋酸溶液中固定 10min，用 0.2%考马斯亮蓝 R250 染色 30min，取出，用 蒸馏水洗，再放入含 20%甲醇和 7%醋酸的脱色液中，脱色 30min。 结果：蕲蛇有 7 条谱带，一级带 2 条、二级带 3 条、三级带 2 条。乌梢蛇有一级带 3 条，二级带和三级带各 2 条，扩散带 1 条。金钱白花蛇有一级带 2 条，二级带 4 条，三级带 2 条。 3）小茴香 供试品溶液的制备：取小茴香粉末约 1.0g，加入 25%浓缩胶缓冲液 1mL， 超声提取 30min，离心 20min（3 500r/min），吸取上清液，加入 40%蔗糖溶液（1∶1），混 匀备用。 易混药材供试溶液的制备：取莳萝子同上法制备。 电泳方法：吸取上述 2 种溶液各 20μL，分别点样于同一聚丙烯酰胺凝胶胶片上，用 溴酚蓝示踪，电泳（初始电流 15mA，稳流 25mA），取出胶片，用考马斯亮蓝 R250 溶液染 色，脱色至谱带清晰。 结果：供试品与易混品比较，具有 4 个特征性谱带。 要点及难点解答 （1）经高温或炮制处理的药材，很可能会因蛋白质的失活而难以得到理想的电泳图谱。 （2）新配制的过硫酸铵溶液在 4℃下可保存 1 周。 （3）加蔗糖溶液增加提取液的密度，以便于样品液沉于样品槽底部。 （4）琼脂层既可导电，又具有密封作用。 （5）一定要将水层彻底除去，且注意不能破坏分离胶的水平表面