式的’嫁接工作在分子水平的操作,缝合、表达、检测,所用到 其难度会有多大吗?” 的工具:基因剪刀、基因针 下面以 ECoRI为例,构建重组线、基因的运载体。 DNA分子模型,体会基因的剪切、拼4个人一组,再次阅读 接、缝合的道理 课前教师下发的“构建DNA ECORI是已发现的500多种限|分子模型的文字指导” 制性内切酶中的一种,它是一种从细讨论模型构建的具体 菌中发现的能在特定位置上切割DNA方法,按“指导”的方法步 分子的酶它的特殊性在于,它在DNA骤、依次完成模拟制作过 分子内部“下剪刀”,专门识别DNA程。并思考教师提出的问 分子中含有的“GATC”这样的序列,题。回答并交流对重组DNA 旦找到就从G和A之间剪断。 技术的理解。 同学们来试一试,动手做一个重 学生:剪刀一一限制性 组DNA模型吧。在动手做之前,先要内切酶(简称限制酶)。它 明白“分子剪刀”和“分子针线”的的作用具有特异性特点,即 用途和使用方法。 识别特定核苷酸序列,切割 用同一种限制性内切酶切割后特定切点。例如大肠杆菌的 的DNA片断其末端可以用连接酶来缝 ECoRI限制酶能识别 GAATTC 这样“剪切拼接”就可以形成重|序列,并在G和A之间切开。 组的DNA分子。 剪切的结果是:产生黏性未 问:(1)制作模型时用到的(剪端(碱基互补配对)。 刀和针线)各代表什么?比较剪切后答:要想获得某个特定 的DNA片断的末端切片,你发现有什性状的基因必须要用限制 么特点呢? 酶切2个切口。可产生2个 2)回顾在模型构建过程中,黏性未端。 每一步的操作和所用到的工具以及 针线一一DMA连接酶。 形成的“产品”,你对重组DNA的操连接的部位:磷酸和脱氧核 作有什么新的理解? 糖交替连接而构成的DNA骨 问:要想获得某个特定性状的基架上的缺口(梯子的扶手) 因必须要用限制酶切几个切口?可不是氢键(梯子的踏板)。 产生几个黏性未端? 结果是:把两个来源不同却 3/53 / 5 式的’嫁接工作在分子水平的操作， 其难度会有多大吗？” 下面以 EcoRI 为例，构建重组 DNA 分子模型，体会基因的剪切、拼 接、缝合的道理。 EcoRI 是已发现的 500 多种限 制性内切酶中的一种，它是一种从细 菌中发现的能在特定位置上切割 DNA 分子的酶。它的特殊性在于，它在 DNA 分子内部“下剪刀”，专门识别 DNA 分子中含有的“GAATTC”这样的序列， 一旦找到就从 G 和 A 之间剪断。 同学们来试一试，动手做一个重 组 DNA 模型吧。在动手做之前，先要 明白“分子剪刀”和“分子针线”的 用途和使用方法。 用同一种限制性内切酶切割后 的DNA片断其末端可以用连接酶来缝 合。这样“剪切拼接”就可以形成重 组的 DNA 分子。 问：（1）制作模型时用到的(剪 刀和针线)各代表什么？比较剪切后 的 DNA 片断的末端切片，你发现有什 么特点呢 ？ （2）回顾在模型构建过程中， 每一步的操作和所用到的工具以及 形成的“产品”，你对重组 DNA 的操 作有什么新的理解？ 问：要想获得某个特定性状的基 因必须要用限制酶切几个切口？可 产生几个黏性未端？ 缝合、表达、检测，所用到 的工具：基因剪刀、基因针 线、基因的运载体。 4 个人一组，再次阅读 课前教师下发的“构建 DNA 分子模型的文字指导”。 讨论模型构建的具体 方法，按“指导”的方法步 骤、依次完成模拟制作过 程。并思考教师提出的问 题。回答并交流对重组 DNA 技术的理解。 学生：剪刀——限制性 内切酶（简称限制酶）。它 的作用具有特异性特点，即 识别特定核苷酸序列，切割 特定切点。例如大肠杆菌的 EcoRI 限制酶能识别 GAATTC 序列，并在 G 和 A 之间切开。 剪切的结果是：产生黏性未 端（碱基互补配对）。 答：要想获得某个特定 性状的基因必须要用限制 酶切 2 个切口。可产生 2 个 黏性未端。 针线——DNA 连接酶。 连接的部位：磷酸和脱氧核 糖交替连接而构成的 DNA 骨 架上的缺口（梯子的扶手）， 不是氢键（梯子的踏板）。 结果是：把两个来源不同却