研究方案 1.研究目标,研究内容拟解决的关键问题 研究目标 1)通过研究HPV感染与宫颈癌发生的内在关系和分子生物学基础,阐明肿瘤发生学中作 为重要外源促发因素的病毒致癌机理。 2)从DNA、RNA和蛋白三个层次全面探索宫颈癌发病机制,特别以病毒致癌蛋白的结构 定格和功能研究作为切入点,逆向求源解译病毒癌基因 3)确定病毒蛋白在宿主细胞的表达方式、信号传导调节过程、易感频度和强度的度量标 准 4)提出针对病毒感染致癌的“治疗窗”,建立终止HPV持续感染状态、保护妇女免受宫颈 癌侵扰的策略及有效方法 研究内容 1)从整体水平,筛査宫颈癌高危人群,观察慢性宫颈病变与HV易感状态的时空窗,确 定HPV感染时机、频度、强度的度量关系, 2)从细胞水平,分离建立宫颈正常细胞、易感细胞及宫颈癌细胞株,在体外培养过程对 比观察细胞生物学、细胞形态学的特征 3)从分子水平,采用双向验证法探索宫颈癌发病的分子生物学原理,一方面运用正向追 综手段,即基因芯片差异显示筛出目的基因,进而追综相应蛋白在致病过程中的功能 演变:另一方面采用逆向求源方法,即二维蛋白显示和蛋白芯片确定致病蛋白,反向 逆源找出致病基因,研究要点包括 (1)HPⅤ相关致癌基因的筛查和确定 (2)病毒致癌蛋白功能结构的鉴定 (3)外源病毒转导致癌蛋白产物在宿主细胞的表达方式、信号传导调节过程、易感频 度和强度的度量标准 (4)调控网络相关活性因子的变化。 4-1三 、 研 究 方 案 ⎯ 4-1⎯ 1. 研究目标，研究内容拟解决的关键问题 研 究 目 标 1) 通过研究HPV感染与宫颈癌发生的内在关系和分子生物学基础, 阐明肿瘤发生学中作 为重要外源促发因素的病毒致癌机理。 2) 从DNA、RNA和蛋白三个层次全面探索宫颈癌发病机制，特别以病毒致癌蛋白的结构 定格和功能研究作为切入点，逆向求源解译病毒癌基因。 3) 确定病毒蛋白在宿主细胞的表达方式、信号传导调节过程、易感频度和强度的度量标 准。 4) 提出针对病毒感染致癌的 “治疗窗”，建立终止HPV持续感染状态、保护妇女免受宫颈 癌侵扰的策略及有效方法。 研 究 内 容 1) 从整体水平，筛查宫颈癌高危人群，观察慢性宫颈病变与HPV易感状态的时空窗，确 定HPV感染时机、频度、强度的度量关系。 2) 从细胞水平，分离建立宫颈正常细胞、易感细胞及宫颈癌细胞株,在体外培养过程对 比观察细胞生物学、细胞形态学的特征。 3) 从分子水平，采用双向验证法探索宫颈癌发病的分子生物学原理，一方面运用正向追 综手段，即基因芯片差异显示筛出目的基因，进而追综相应蛋白在致病过程中的功能 演变；另一方面采用逆向求源方法，即二维蛋白显示和蛋白芯片确定致病蛋白，反向 逆源找出致病基因，研究要点包括: (1) HPV相关致癌基因的筛查和确定； (2) 病毒致癌蛋白功能结构的鉴定； (3) 外源病毒转导致癌蛋白产物在宿主细胞的表达方式、信号传导调节过程、易感频 度和强度的度量标准； (4) 调控网络相关活性因子的变化