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《生物化学实验》实验前准备:2005 年 5 月 一、实验内容、试剂和器材(160 人,80 组) (一)实验一、淀粉的提取 实验二、总糖和还原糖的测定(定性) 1. 试剂: (1) (白色 250ml)铜试剂(4000ml):(A)26g 硫酸铜加水至于 2000ml (B)48g 酒石酸钾钠+80 克无水碳酸钠+100 克碳酸氢钠+72 克草酸钾+3.2 克碘酸钾 制备溶液 B 时,先用法 700ml 热水溶化前三种试剂,再加后两种至于 2000ml,最后将(A)、 (B)等量混合。 (2) (不分装)0.005N 硫代硫酸钠(20000ml):24.8g 硫代硫酸钠+2g 碳酸钠+水配 20000ml 0.005N 溶液。 (3) (白色滴瓶)1%淀粉(500ml):5g 可溶性淀粉溶于 500ml 饱和的 NaCL 溶液中煮沸。 (4) (棕色 60ml)2%碘化钾(2000ml):40gKI+水至于 2000ml。(定性) (5) (强酸)(白色 60ml)2N 硫酸(1500ml):166.6ml 母液溶于水至 1500ml。 (6) (白色 60ml)标准葡萄糖(1000ml 0.5mg/ml):0.5g 葡萄糖+水至 1000ml。 (7) 地瓜或山芋 3Kg , 一组 20 克。 (8) (白色 60ml)待测还原糖:400ml 稀释 800ml。 2. 器材:(1) 菜刀 12 支(2)菜板 12 块(3)捣碎机 12 台(4)恒温水浴锅 12 台(5)滴定管 48 支(6) 子 铁架台+蝴蝶夹+铁圈 48 套。 (二)实验三、四、五、六淀粉酶性质的测定 1. 试剂: (1) (白色 125ml)1%蔗糖(2500ml):25g 蔗糖+水至 2500ml 溶液。 (2) (白色 250ml)本尼迪克试剂(3000ml):混合(A)、(B)。 (A)51.9g 硫酸铜+水至 450ml。 (B)519g 柠檬酸钠+300g 碳酸钠+水加热溶解至 2550ml,冷却。 (3) (白色 250ml)0.5%淀粉(6000ml):30g 淀粉+水至 6000ml, 煮沸。 (4) (白色 250ml)含 0.3%NaCL 的 0.5%淀粉(4000ml):20g 淀粉+12g NaCL+水至 4000ml,煮沸。 (5) (白棕色 60ml)1% NaCL (1000ml): 10g NaCL+水至 1000ml 溶液。 (6) (白棕色 60ml)0.1%CuSO4(1000ml):15gCuSO4+H2O 至 1000ml 溶液。 (7) (手易着色)(棕色 60ml)碘—碘化钾溶液(1000ml): (8) (棕色 250ml)0.2M 磷酸氢二钠(8000ml):573.2g+水至 8000ml 溶液。 (9) (白色 60ml)(白色 125ml)0.1M 柠檬酸(2000ml):42.0g+水至 2000ml 溶液。 2. 器材:(1) 恒温水浴锅 12 台(2) pH 计 4 台 (3)电子天平均数(4)电磁炉。 (三)实验七 米氏常数和最大反应速度(碱性磷酸酶反应动力学测定)。 1. 试剂: (1) (60ml 棕色)10mM PNPP(300ml):1.113g+H2O 至 300ml 溶液。 (2) (白色 60ml)20mM MgCL2(1000ml):4.07g+水至 1000ml 溶液。 (3) (白色 250ml)0.1M 碳酸钠—碳酸氢钠 PH 10.1 缓冲液(1500ml ,150 人要 3000ml):0.1M 碳 酸钠 ( 21.2g 碳酸钠+水至 2000ml); 0.1M 碳酸氢钠( 8.4gNaHCO3+H2O 至 1000ml 溶液)。 1050ml Na2CO3+450ml NaHCO3 至 1500ml 缓冲液。 (4) (腐蚀性)(白色 250ml)0.1M NaOH(3000ml):50ml 6M NaOH+H2O 至 3000ml 溶液。(150 人要 4000ml)。 (5) (不分装)酶液(3mg 碱性磷酸酶,旧的要 12mg +水至 500ml)。(缺货)《生物化学实验》实验前准备:2005 年 5 月 一、实验内容、试剂和器材(160 人,80 组) (一)实验一、淀粉的提取 实验二、总糖和还原糖的测定(定性) 1. 试剂: (1) (白色 250ml)铜试剂(4000ml):(A)26g 硫酸铜加水至于 2000ml (B)48g 酒石酸钾钠+80 克无水碳酸钠+100 克碳酸氢钠+72 克草酸钾+3.2 克碘酸钾 制备溶液 B 时,先用法 700ml 热水溶化前三种试剂,再加后两种至于 2000ml,最后将(A)、 (B)等量混合。 (2) (不分装)0.005N 硫代硫酸钠(20000ml):24.8g 硫代硫酸钠+2g 碳酸钠+水配 20000ml 0.005N 溶液。 (3) (白色滴瓶)1%淀粉(500ml):5g 可溶性淀粉溶于 500ml 饱和的 NaCL 溶液中煮沸。 (4) (棕色 60ml)2%碘化钾(2000ml):40gKI+水至于 2000ml。(定性) (5) (强酸)(白色 60ml)2N 硫酸(1500ml):166.6ml 母液溶于水至 1500ml。 (6) (白色 60ml)标准葡萄糖(1000ml 0.5mg/ml):0.5g 葡萄糖+水至 1000ml。 (7) 地瓜或山芋 3Kg , 一组 20 克。 (8) (白色 60ml)待测还原糖:400ml 稀释 800ml。 2. 器材:(1) 菜刀 12 支(2)菜板 12 块(3)捣碎机 12 台(4)恒温水浴锅 12 台(5)滴定管 48 支(6) 子 铁架台+蝴蝶夹+铁圈 48 套。 (二)实验三、四、五、六淀粉酶性质的测定 1. 试剂: (1) (白色 125ml)1%蔗糖(2500ml):25g 蔗糖+水至 2500ml 溶液。 (2) (白色 250ml)本尼迪克试剂(3000ml):混合(A)、(B)。 (A)51.9g 硫酸铜+水至 450ml。 (B)519g 柠檬酸钠+300g 碳酸钠+水加热溶解至 2550ml,冷却。 (3) (白色 250ml)0.5%淀粉(6000ml):30g 淀粉+水至 6000ml, 煮沸。 (4) (白色 250ml)含 0.3%NaCL 的 0.5%淀粉(4000ml):20g 淀粉+12g NaCL+水至 4000ml,煮沸。 (5) (白棕色 60ml)1% NaCL (1000ml): 10g NaCL+水至 1000ml 溶液。 (6) (白棕色 60ml)0.1%CuSO4(1000ml):15gCuSO4+H2O 至 1000ml 溶液。 (7) (手易着色)(棕色 60ml)碘—碘化钾溶液(1000ml): (8) (棕色 250ml)0.2M 磷酸氢二钠(8000ml):573.2g+水至 8000ml 溶液。 (9) (白色 60ml)(白色 125ml)0.1M 柠檬酸(2000ml):42.0g+水至 2000ml 溶液。 2. 器材:(1) 恒温水浴锅 12 台(2) pH 计 4 台 (3)电子天平均数(4)电磁炉。 (三)实验七 米氏常数和最大反应速度(碱性磷酸酶反应动力学测定)。 1. 试剂: (1) (60ml 棕色)10mM PNPP(300ml):1.113g+H2O 至 300ml 溶液。 (2) (白色 60ml)20mM MgCL2(1000ml):4.07g+水至 1000ml 溶液。 (3) (白色 250ml)0.1M 碳酸钠—碳酸氢钠 PH 10.1 缓冲液(1500ml ,150 人要 3000ml):0.1M 碳 酸钠 ( 21.2g 碳酸钠+水至 2000ml); 0.1M 碳酸氢钠( 8.4gNaHCO3+H2O 至 1000ml 溶液)。 1050ml Na2CO3+450ml NaHCO3 至 1500ml 缓冲液。 (4) (腐蚀性)(白色 250ml)0.1M NaOH(3000ml):50ml 6M NaOH+H2O 至 3000ml 溶液。(150 人要 4000ml)。 (5) (不分装)酶液(3mg 碱性磷酸酶,旧的要 12mg +水至 500ml)。(缺货)
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