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0.33k 0.25V 0.1k 0.091V 从米氏方程中求得:当反应速度达到最大反应速度的90%,则 v=Vmax[囹fkm 90%V-100%VTS](km+[S])即[S]=9km 在进行睡活力测定时,通常用4k的底物浓度即可。 反应速度达最大反应速度的百分率也近似底表示被底物饱和的百分率 =K3 [ES] Vmx=K3 [Eo] vVmax-[ES]/[Eo] (5)m还可以推断某一代谢物在体内可能的代谢途径。 丙酮酸→乳酸 乳酸脱氢膚(1.7×10-5) 丙丽酸脱氢酶(13×103) 乙醛 丙酮酸脱控悔 1.0x10-3 当丙酮酸浓度较低时,代谢走哪条途径决定于k最小的南。 4、Vmax的意义 是一个基本常数。在一定酶浓度下,与具体的底物有关,月随者温度、H和离子强度 而改变。 5、K的意义 当底物浓度很大时,yK;[ES]=K;[E]=Vax ..K即为转换数,用Kcat表示 转换数 定条件下,每秒钟每个酶分子(mol、mol)转化底物的分子(μmol mol)数 它表示的的催化效率 6、Keat/Km的意义 单位亲合力的转换数,也表示催化效率 常用来比较 同酶的效率高低 7、Km和Vmax的求法 二者知其一,求另一,带入即可 二者都不知,可否用给定的两组数据,带入,组成方程组来解? 否!因为那是银直线方程的方法 米氏常数可根据实验数据作图法直接求得:先测定同底物浓度的反应初速度,从 与[S)的关系曲线求得V,然后再从12求得相应的[S即为km (似值 米氏方程图从中可见,Vm随x不疏定,'.近似 把米氏方程转化为直线方程,常用方法有: (D (Line 1e-Burk)双佰倒数作图法 双倒 图 对1S的 作图,又称1 eweaver-BurK】 ,即取
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