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当[S]不高不低时,及【S】=Km,为混合级 从曲线形态看,是一条双曲线,米氏方程是否? 米氏方程是双曲线的推导 v=Vmax [S]/Km+ [s] 上式变换为 vKm+v [S]=Vmax [S] 两边各加一Vmax Km 得 vKm+v [S]-Vmax Km=Vmax [S]-Vmax Km vKm+v [S]-Vmax Km x[s]= Vmax K v(Km+[S]) Vmax (Km+[S])=-Vmax Km (v -Vmax)(S+Km)=-Vmax Km (x-a)(y+b)-c 双曲线方程 3.米氏常数的意义 定义式为K2+K3/K 数值上等于当速度达最大速度一半时的底物浓度,所以,K阳有单位 单位为摩尔开(m加1L. v=Vmax/2, km=[S] v=Vmax [S]/Km+[S] vKm+Vs=Vmax [S] vKm-Vmax [S] r vKm Wmv) vKm=(Vmax -v)[S Km=(Vmax/v-1)[s] 意义: (1)k是裤的一个基本的特征常数。其大小与:的浓度无关,而与膊的结构和具体 的底物有关,且随着温度、pH和离子强度而改变。 可用于鉴别酶(多酶一底物,是 谁?) (2)从k可判断酶的专一性和天然底物.Km最小的底物,通常就是该裤的最适底物 也就是天然底物。 一,多底物,亲谁 (3)当k2>>k时,k的大小可以表示南与底物的亲和性。 S+E-→ES一k3→E+P km=(k2+ks)/k .k可以看作ES的解离常数k: SJE kmn=ks= 当m大,说明ES容易解离,酶与底物结合的亲和力小 (4)从k的大小,可以知道正确测定酶活力时所需的底物浓度 也可以算出某一底物浓度时达最大反应速度的倍数 IST 1000k 0.999V 100k 可见底物浓度再增倍 10k 0.91V 速度增量已极 0.75V 所以,过多的底物是浪费 0.5v
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