成菌种悬液。 2．分装安瓿瓶 用无菌毛细管或长滴管将菌种悬液加入安瓿瓶内。 3．预冻 预冻可在低温冰箱中进行，也可在附有冻结舱的冻干机中进行， 预冻的温度范围在-25℃～-40℃。 4．真空升华干燥 安瓿瓶菌种预冻后放入冻干机真空箱内，进行真空升华干燥。 5．真空封存与保藏 真空干燥后保持真空度 6．7Pa 以下，用火焰封存安瓿瓶口。置 4℃～10℃避光保存。 五、注意事项 1．不同发酵剂菌种的冷却速度不同，比如酵母菌的合适冷却速度为 3℃／min～10℃／min。 2．预冻的温度范围在-25℃～-40℃，若温度高于-25℃，则冻结不结 实，影响升华干燥。一般采用-35℃预冻 1h。 六、思考题 1．制备菌悬液过程中为什么要加入保护剂? 2．低温冷冻干燥保藏方法的优点?