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染的病毒等。荧光PCR可以进 步发展为PCR临床自动化诊 断打下基础 2.3.6定量PCR 定量PCR技术是指用外标 法(荧光杂交探针保证特异性) 通过监测PCR过程(监测扩增效 率)达到精确定量起始模板数的 目的,同时以内对照有效排除假 阴性结果(扩增效率为零)。 3DNA测序技术 制作物理图谱的过程是 个逐步精细的过程。第一步把每 条染色体分成平均长度在 400kb的长片段,每段克隆到一 个YAC上,所有YAC克隆都 按照其在染色体上的实际位置 进行排序,我们就得到了一个能 够覆盖整个染色体的YAC文 库 把每一个YAC克隆携带的 染色体片段经部分酶切形成 系列有重叠区域的40kb左右的 片段克隆到粘粒上,得到粘粒文 库。每个粘粒上的染色体片段再 经酶切形成4kb左右的片段克 隆到测序专用的质粒载体上。测 序质粒上携带的4kb的片段就 可以用现在常规测序的方法进 行测序了。把所有质粒克隆的 DNA片段序列读出,再按照各 个片段在染色体上的实际位置 进行排列,最后就可以得到染色 体的全部核苷酸碱基对序列。染 色体的DNA碱基序列是基因组 物理图谱的最精细形式染的病毒等。荧光 PCR 可以进 一步发展为 PCR 临床自动化诊 断打下基础 2.3.6 定量 PCR 定量 PCR 技术是指用外标 法(荧光杂交探针保证特异性) 通过监测 PCR 过程(监测扩增效 率)达到精确定量起始模板数的 目的,同时以内对照有效排除假 阴性结果(扩增效率为零)。 3 DNA 测序技术 制作物理图谱的过程是一 个逐步精细的过程。第一步把每 条染色体分成平均长度在 400kb 的长片段,每段克隆到一 个 YAC 上,所有 YAC 克隆都 按照其在染色体上的实际位置 进行排序,我们就得到了一个能 够覆盖整个染色体的 YAC 文 库。 把每一个 YAC 克隆携带的 染色体片段经部分酶切形成一 系列有重叠区域的 40kb 左右的 片段克隆到粘粒上,得到粘粒文 库。每个粘粒上的染色体片段再 经酶切形成 4kb 左右的片段克 隆到测序专用的质粒载体上。测 序质粒上携带的 4kb 的片段就 可以用现在常规测序的方法进 行测序了。把所有质粒克隆的 DNA 片段序列读出,再按照各 个片段在染色体上的实际位置 进行排列,最后就可以得到染色 体的全部核苷酸碱基对序列。染 色体的 DNA 碱基序列是基因组 物理图谱的最精细形式
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