定容至刻度,摇匀。(注:样品为经大孔吸附树脂吸附纯化并配合溶剂法提取制得的大豆总异黄酮提取纯 化物,浅黄棕色粉末,味苦) (2)标准曲线的绘制:准确吸取0.05、01、0.15、0.2、0.3、04mL标准品溶液分别置于10mL容量 瓶中,并各加95%乙醇1.0mL,再加蒸馏水稀释至刻度,摇匀。以lmL95%乙醇加水到10mL作空白对照, 在259mm处测得吸光度,以测得之吸光度与纯品量绘制标准曲线并得出回归方程见表28-1。 计算公式 回归方程y=ax+b相关系数r=0.996 式中b—一截距,0.2006; d一斜率,78118 表28-1标准曲线与回归方程 编号 2 4 5 6 0.52 1.04 1.56 2.08 3.12 4.16 0.0432 0.1080 0.1763 0.2735 0.3654 0.5131 (3)样品测定:分别准确吸取样品液0.3mL于3只10mL容量瓶中,以下按标准曲线制备项下操作 在259mm处测定吸收度,计算平均值,按标准曲线方程计算含量,并计算样品的大豆总异黄酮质量分数。 结果见表28 表28-2样品中的大豆总异黄酮含量 吸光度/OD 0.2837 0.2837 0.2795 平均吸光度/OD 0.2835 含量/(g/mL 8.0452 5.精密度实验 准确吸取标准品溶液0.2mL,分别置5只10mL容量瓶中,按标准曲线项下操作,测定吸收度,计算 相对标准差(RSD)为2.6%。 6.加样回收率实验 准确吸取1、0.2、0.2、0.2、0.lmL标准品溶液于5只lmL容量瓶中,再分别准确加入样品液0.3mL, 照标准曲线制备项下操作,计算加样回收率,结果见表28-3 表28-3加样回收率实验 平均RSD/ 加标准品质量/g 1.04 2.08 1.04 2.08 2.08 0.3mL样品中相当 2.41492.4149241492414924149 金雀黄素的量/g OD 值 0.36650.49650.49320.49880.36256 定容至刻度，摇匀。（注：样品为经大孔吸附树脂吸附纯化并配合溶剂法提取制得的大豆总异黄酮提取纯 化物，浅黄棕色粉末，味苦）。 （2）标准曲线的绘制：准确吸取 0.05、0.1、0.15、0.2、0.3、0.4mL 标准品溶液分别置于 10mL 容量 瓶中，并各加 95%乙醇 1.0mL，再加蒸馏水稀释至刻度，摇匀。以 lmL95%乙醇加水到 l0mL 作空白对照， 在 259nm 处测得吸光度，以测得之吸光度与纯品量绘制标准曲线并得出回归方程见表 28—1。 计算公式： 回归方程 y = ax + b 相关系数 r = 0.9996 式中 b——截距，0.2006； d——斜率，7.8118。 表 28—1 标准曲线与回归方程 编号 1 2 3 4 5 6 x/μg 0.52 1.04 1.56 2.08 3.12 4.16 y 0.0432 0.1080 0.1763 0.2735 0.3654 0.5131 （3）样品测定：分别准确吸取样品液 0.3mL 于 3 只 10mL 容量瓶中，以下按标准曲线制备项下操作， 在 259nm 处测定吸收度，计算平均值，按标准曲线方程计算含量，并计算样品的大豆总异黄酮质量分数。 结果见表 28—2。 表 28—2 样品中的大豆总异黄酮含量 编号 1 2 3 吸光度/OD 0.2837 0.2837 0.2795 平均吸光度/OD 0.2835 含量/（μg/mL） 8.0452 5. 精密度实验 准确吸取标准品溶液 0.2mL，分别置 5 只 10mL 容量瓶中，按标准曲线项下操作，测定吸收度，计算 相对标准差（RSD）为 2.6%。 6. 加样回收率实验 准确吸取 0.1、0.2、0.2、0.2、0.1mL 标准品溶液于 5 只 l0mL 容量瓶中，再分别准确加入样品液 0.3mL， 照标准曲线制备项下操作，计算加样回收率，结果见表 28—3。 表 28—3 加样回收率实验 1 2 3 4 5 平均 RSD/% 加标准品质量/μg 1.04 2.08 1.04 2.08 2.08 0.3mL 样品中相当 金雀黄素的量/μg 2.4149 2.4149 2.4149 2.4149 2.4149 OD 值 0.3665 0.4965 0.4932 0.4988 0.3625