测得相当金雀 黄素的含量/ 3.46794.4921 4.46634.5046 4489 回收率/% 98.63 1004799.08 平均回收率/% 9986 1.06 7.结果计算 样品中大豆总异黄酮的百分含量(以金雀异黄素计算)按稀释度和金雀异黄素标准曲线的相应量计算 8.注释 若受试物为大豆的制品,如水豆腐、干豆腐、豆芽、豆豉等可采用食品粉碎机破碎后冷冻干燥,分别 取干重为l0g的受试样品置于锥形瓶中,加入石油醚50mL,放置24h,过滤,残渣用滤纸筒包好,置于水 浴上的索氏提取器中用甲醇提取6h,注意温度低于π0℃。提取液回收甲醇,残渣上大孔吸附树脂柱,用 水洗脱除去糖类成分,续以95%的乙醇洗脱,将乙醇洗脱液浓缩,干燥,以95%乙醇定容为25mL。豆浆、 豆汁等液体大豆饮品可在60℃水浴上蒸干,取干重为1啁g的干燥物与干燥后的水豆腐等一样处理,得到不 同的样品95%乙醇溶液 二、大豆异黄酮的测定方法(高效液相色谱法) 本方法适用于大豆制品中大豆异黄酮的测定。 本方法大豆异黄酮染料木素的最低检出限为10ng:大豆苷元的最低检出限为30ngo 1.方法提要 大豆异黄酮( soybean isoflavones,简称ISO)是一类从大豆中分离提取的具有抗氧化、抗肿瘤、改善 心血管功能的主要活性成分。目前发现的大豆异黄酮包括游离型苷元和结合型的糖苷两类共有12种,染 料本素( Genistein,G)和大豆苷元( Daidzein,D)是其中两种重要化合物。本法用80%乙醇作为溶剂, 提取样品中的染料木素、大豆苷元,以反相高效液相色谱分离,在紫外检测器260nm条件下检测其峰面积 以染料木素和大豆苷元两项含量之和计算大豆异黄酮含量。 2.仪器 (1)LC高效液相色谱仪,C—RIB色谱处理机 (2)检测器:SPD2AS紫外检测器。 (3)离心机。 (4)超声波振荡器。 3.试剂 (1)甲醇(色谱纯)。 (2)乙醇(优级纯)。 (3)双重蒸馏水 (4)大豆异黄酮标准品:染料木素与大豆苷元标准品(美国 Sigma公司产品),以染料木素的大豆苷 元两项之和作为大豆异黄酮含量计算。 (5)大豆异黄酮标准溶液:准确称取染料木素标准品5.0mg,大豆苷元标准品3.2mg,各自用流动相7 测得相当金雀 黄素的含量/μg 3.4679 4.4921 4.4663 4.5046 3.4489 回收率/% 101.25 99.87 98.63 100.47 99.08 平均回收率/% 99.86 1.06 7. 结果计算 样品中大豆总异黄酮的百分含量（以金雀异黄素计算）按稀释度和金雀异黄素标准曲线的相应量计算。 8. 注释 若受试物为大豆的制品，如水豆腐、干豆腐、豆芽、豆豉等可采用食品粉碎机破碎后冷冻干燥，分别 取干重为 l0g 的受试样品置于锥形瓶中，加入石油醚 50mL，放置 24h，过滤，残渣用滤纸筒包好，置于水 浴上的索氏提取器中用甲醇提取 6h，注意温度低于 70℃。提取液回收甲醇，残渣上大孔吸附树脂柱，用 水洗脱除去糖类成分，续以 95%的乙醇洗脱，将乙醇洗脱液浓缩，干燥，以 95%乙醇定容为 25mL。豆浆、 豆汁等液体大豆饮品可在 60℃水浴上蒸干，取干重为 10g 的干燥物与干燥后的水豆腐等一样处理，得到不 同的样品 95%乙醇溶液。 二、大豆异黄酮的测定方法（高效液相色谱法） 本方法适用于大豆制品中大豆异黄酮的测定。 本方法大豆异黄酮染料木素的最低检出限为 10ng；大豆苷元的最低检出限为 30ng。 1. 方法提要 大豆异黄酮（soybean isoflavones，简称 ISO）是一类从大豆中分离提取的具有抗氧化、抗肿瘤、改善 心血管功能的主要活性成分。目前发现的大豆异黄酮包括游离型苷元和结合型的糖苷两类共有 12 种，染 料本素（Genistein，G）和大豆苷元（Daidzeiu，D）是其中两种重要化合物。本法用 80%乙醇作为溶剂， 提取样品中的染料木素、大豆苷元，以反相高效液相色谱分离，在紫外检测器 260nm 条件下检测其峰面积， 以染料木素和大豆苷元两项含量之和计算大豆异黄酮含量。 2. 仪器 （1）LC 高效液相色谱仪，C—RIB 色谱处理机。 （2）检测器：SPD—2AS 紫外检测器。 （3）离心机。 （4）超声波振荡器。 3. 试剂 （1）甲醇（色谱纯）。 （2）乙醇（优级纯）。 （3）双重蒸馏水。 （4）大豆异黄酮标准品：染料木素与大豆苷元标准品（美国 Sigma 公司产品），以染料木素的大豆苷 元两项之和作为大豆异黄酮含量计算。 （5）大豆异黄酮标准溶液：准确称取染料木素标准品 5.0mg，大豆苷元标准品 3.2mg，各自用流动相