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材料是葡萄糖凝胶( Sephadex ged)和 琼脂糖凝胶( agarose gel) 根据蛋白质带电性质不同,有 1、电泳法 各种蛋白质在同一pH条件下,因 分子量和电荷数量不同而在电场中的 迁移率不同而得以分开。值得重视的是 等电聚焦电泳,这是利用一种两性电解 质作为载体,电泳时两性电解质形成 个由正极到负极逐渐增加的pH梯度 当带一定电荷的蛋白质在其中泳动时 到达各自等电点的pH位置就停止,此 法可用于分析和制备各种蛋白质。 2、离子交换层析法 离子交换剂有阳离子交换剂和阴 离子交换剂,当被分离的蛋白质溶液流 经离子交换层析柱时,带有与离子交换 剂相反电荷的蛋白质被吸附在离子交 换剂上,随后用改变pH或离子强度办 法将吸附的蛋白质洗脱下来。 根据配体特异性结合,有: 亲和层析法( aflinity chromatography)是分离蛋白质的一种 极为有效的方法,它经常只需经过一步 处理即可使某种待提纯的蛋白质从很 复杂的蛋白质混合物中分离出来,而且 纯度很高。这种方法是根据某些蛋白质 与另一种称为配体( Ligand)的分子能特 异而非共价地结合。其基本原理:蛋白 质在组织或细胞中是以复杂的混合物 形式存在,每种类型的细胞都含有上千 种不同的蛋白质,因此蛋白质的分离 ( Separation),提纯( Purification)和 鉴定( Characterization)是生物化学中 的重要的一部分,至今还没的单独或 套现成的方法能移把任何一种蛋白质 从复杂的混合蛋白质中提取出来,因此 往往采取几种方法联合使用材料是葡萄糖凝胶(Sephadex ged)和 琼脂糖凝胶(agarose gel)。 根据蛋白质带电性质不同,有 1、电泳法 各种蛋白质在同一 pH 条件下,因 分子量和电荷数量不同而在电场中的 迁移率不同而得以分开。值得重视的是 等电聚焦电泳,这是利用一种两性电解 质作为载体,电泳时两性电解质形成一 个由正极到负极逐渐增加的 pH 梯度, 当带一定电荷的蛋白质在其中泳动时, 到达各自等电点的 pH 位置就停止,此 法可用于分析和制备各种蛋白质。 2、离子交换层析法 离子交换剂有阳离子交换剂和阴 离子交换剂,当被分离的蛋白质溶液流 经离子交换层析柱时,带有与离子交换 剂相反电荷的蛋白质被吸附在离子交 换剂上,随后用改变 pH 或离子强度办 法将吸附的蛋白质洗脱下来。 根据配体特异性结合,有: 亲和层析法(aflinity chromatography)是分离蛋白质的一种 极为有效的方法,它经常只需经过一步 处理即可使某种待提纯的蛋白质从很 复杂的蛋白质混合物中分离出来,而且 纯度很高。这种方法是根据某些蛋白质 与另一种称为配体(Ligand)的分子能特 异而非共价地结合。其基本原理:蛋白 质在组织或细胞中是以复杂的混合物 形式存在,每种类型的细胞都含有上千 种不同的蛋白质,因此蛋白质的分离 (Separation),提纯(Purification)和 鉴定(Characterization)是生物化学中 的重要的一部分,至今还没的单独或一 套现成的方法能移把任何一种蛋白质 从复杂的混合蛋白质中提取出来,因此 往往采取几种方法联合使用
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