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三、实验材料、主要仪器和试剂 1。实验材料 苹果、面粉等 2.主要仪器 (1)分光光度计 (2)水浴锅 (3)具塞刻度试管:20ml10 (4)刻度吸管:1mL1,2ml4,5ml3 (5)容量瓶:100mL2 (6)漏斗 (7)研体 3.试剂 (1)铜试剂: 4%CuS045H,(0 B、称取24g无水碳酸钠,用850mL水溶于大烧杯中,加入2g含4分子结品水的酒 石酸钾钠,待全溶(应加热)后加入碳酸氢钠16g,再加入120g无水硫酸钠(加热),全 溶及冷却后加水至900mL,沉淀1~2d,取上清液(要求严格时过滤)备用。 使用前将A与B按1:9混匀即可使用。 (2)钼酸试剂:25g钼酸铵(NH)6M0, ,4H,0溶于450mL蒸馏水中(加热浴 解,但温度接近150℃时易分解),待冷却后再加入21mL浓HS0,混匀。另将3g砷酸氢 二钠Na,Has047H,O)溶解于25mL蒸馏水中,然后加到钼酸铵溶液中,室温下放置于棕 色瓶中可长期使用。 (3)200ug/mL标准简萄糖原液:准确称取分折纯简萄糖200mg,溶解定容到 1000mL. 四、操作步骤 1.标准曲线的制作: 在一系列刻度试管中,分别加入200μg/mL标准葡萄糖0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 及0.6mL,再顺序加入蒸馏水2、1.9、18、1.7、16、1.5及14mL,配成浓度分别为0、 10、20、30、40、50及60“gmL的系列萄萄糖溶液。每试管加入铜试剂2mL,混匀后沸 水浴中加热10min,立即冷却,再加入2mL砷钼酸试剂,振荡两分钟后稀释到20mL,用 分光光度计在620nm波长下比色,测其光密度OD62m(做一式两份)。 以糖浓度微克数为横坐标,光密度OD6om为纵坐标,绘制标准曲线。 2。植物样品中还原糖的提取: 将样品洗净,吸干其表面水分,切碎混匀,称取1g放入研钵中,加入约0.5g石英砂 磨成匀浆,加水将样品由玻璃漏斗神入1O0mL容量瓶中,加水达70~80mL,摇匀后置于 80C恒温水浴上浸提0.5h.8 三、实验材料、主要仪器和试剂 1.实验材料 苹果、面粉等 2.主要仪器 (1)分光光度计 (2)水浴锅 (3)具塞刻度试管:20mL 10 (4)刻度吸管:1 mL 1,2 mL 4,5 mL 3 (5)容量瓶:100 mL 2 (6)漏斗 (7)研钵 3.试剂 (1)铜试剂: A、4%CuSO4 5H2O B、称取 24g 无水碳酸钠,用 850mL 水溶于大烧杯中,加入 2g 含 4 分子结晶水的酒 石酸钾钠,待全溶(应加热)后加入碳酸氢钠 16g,再加入 120g 无水硫酸钠(加热),全 溶及冷却后加水至 900mL,沉淀 1~2d,取上清液(要求严格时过滤)备用。 使用前将 A 与 B 按 1∶9 混匀即可使用。 (2)砷钼酸试剂:25g 钼酸铵 (NH4)6Mo7O24 4H2O 溶于 450mL 蒸馏水中(加热溶 解,但温度接近 150℃时易分解),待冷却后再加入 21mL 浓 H2SO4混匀。另将 3g 砷酸氢 二钠(Na2HasO4 7H2O)溶解于 25mL 蒸馏水中,然后加到钼酸铵溶液中,室温下放置于棕 色瓶中可长期使用。 (3)200μg/mL 标准葡萄糖原液:准确称取分析纯葡萄糖 200mg,溶解定容到 1000mL。 四、操作步骤 1.标准曲线的制作: 在一系列刻度试管中,分别加入 200μg/mL 标准葡萄糖 0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 及 0.6 mL,再顺序加入蒸馏水 2、1.9、1.8、1.7、1.6、1.5 及 1.4 mL,配成浓度分别为 0、 10、20、30、40、50 及 60μg/mL 的系列葡萄糖溶液。每试管加入铜试剂 2mL,混匀后沸 水浴中加热 10min,立即冷却,再加入 2mL 砷钼酸试剂,振荡两分钟后稀释到 20mL,用 分光光度计在 620nm 波长下比色,测其光密度 OD620nm(做一式两份)。 以糖浓度微克数为横坐标,光密度 OD620nm为纵坐标,绘制标准曲线。 2.植物样品中还原糖的提取: 将样品洗净,吸干其表面水分,切碎混匀,称取 1g 放入研钵中,加入约 0.5g 石英砂, 磨成匀浆,加水将样品由玻璃漏斗冲入 100mL 容量瓶中,加水达 70~80mL,摇匀后置于 80℃恒温水浴上浸提 0.5h
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