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实验二还原糖含量测定砷钼酸比色法 一、目的 植物体内的还原触主要是简萄糖、果糖和麦芽糖。它们在植物体内的分布,不仅反映 植物体内碳水化合物的运转情况,而且也是合成其它成分碳架来源和呼吸作用的基质。此 外,水果、蔬菜中含糖量的多少,也是鉴定其品质的重要指标。其它碳水化合物,如淀粉 蔗糖等,经水解也生成还原糖。因此,测定还原糖的方法在研究植物体内生理生化变化和 测定植物体内碳水化合物方面都是很重要的。 二,原理 还原糖是具有羰基(>C-0)的糖 能将其它物质还原而其本身被氧化 (1)还原糖在碱性条件及有酒石酸钾钠存在下加热,可以定量地还原二价铜离子为 价铜离子,产生砖红色的氧化亚铜沉淀,其本身被氧化。具体反应如下: CuSO,2NaOH -Naz(SOa)+Cu(OH)2 HO-CH-COONa O-CH-COONa Cu(OH +2H,0 HO-CH-COOK O-CH-COOK CHO H-C-OH Cu -CH-COONa HO-C-H + O-CH-COOK H-C-OH +2H,0 H-C-OH CH2OH COOH 90+2H0- H-COONa +Cu20, HO-CH-COOK (2)氧化亚铜在酸性条件下,可将钼酸铵还原,还原型的钼酸铵再与砷酸氢二钠起作 用,生成一种蓝色复合物神钼蓝,其颜色深浅在一定范围内与还原糖的含量(即被还 原的C20量)成正比,用标准葡萄糖与砷钼酸作用,比色后做标准,就可测得样品还原 糖含量 CuO+H2SO4 Cu' 2Cu+Mo0,2+S0,2→2Cu2+蓝色复合物 7 实验二 还原糖含量测定 砷钼酸比色法 一、目的 植物体内的还原糖主要是葡萄糖、果糖和麦芽糖。它们在植物体内的分布,不仅反映 植物体内碳水化合物的运转情况,而且也是合成其它成分碳架来源和呼吸作用的基质。此 外,水果、蔬菜中含糖量的多少,也是鉴定其品质的重要指标。其它碳水化合物,如淀粉、 蔗糖等,经水解也生成还原糖。因此,测定还原糖的方法在研究植物体内生理生化变化和 测定植物体内碳水化合物方面都是很重要的。 二,原理; 还原糖是具有羰基(>C=O)的糖,能将其它物质还原而其本身被氧化。 (1) 还原糖在碱性条件及有酒石酸钾钠存在下加热,可以定量地还原二价铜离子为一 价铜离子,产生砖红色的氧化亚铜沉淀,其本身被氧化。具体反应如下: CuSO4 + 2NaOH Na2(SO4) + Cu(OH)2 HO―CH―COONa O―CH―COONa Cu(OH)2 + ∣ u ∣ + 2H2O HO―CH―COOK O―CH―COOK CHO H―C―OH ∣ O―CH―COONa HO―C―H Cu ∣ + ∣ + 2H2O O―CH―COOK H―C―OH ∣ H―C―OH ∣ CH2OH COOH ∣ HO―CH―COONa (CHOH)4 + 2 ∣ + Cu2O↓ ∣ HO―CH―COOK CH2OH (2)氧化亚铜在酸性条件下,可将钼酸铵还原,还原型的钼酸铵再与砷酸氢二钠起作 用,生成一种蓝色复合物 砷钼蓝,其颜色深浅在一定范围内与还原糖的含量(即被还 原的 Cu2O 量)成正比,用标准葡萄糖与砷钼酸作用,比色后做标准,就可测得样品还原 糖含量。 Cu2O + H2SO4 Cu + 2Cu + + MoO4 2- + SO4 2- 2Cu 2+ + 蓝色复合物
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