总糖(%)。查曲线所得水解后还职糖毫克数稀释倍数0910 样品毫克数 六、附注 1.离心时对称位置的离心管必须配平。 2。标准曲线制作与样品测定应同时进行显色，并使用同一空白调零点和比色。 3.面粉中还原糖含量较少，计算总糖时可将其合并入多糖一起考虑。 七、思考题 1.3,5二硝基水杨酸比色法是如何对总糖进行测定的？ 2.如何正确绘制和使用标准曲线？ 参考答案 1.植物中的总糖包括单糖、寡糖和多糖，单糖是还原糖，可直接测定。而没有还原 性的寡糖和多糖，需用高浓度的酸在加热的条件下水解成有还原性的单糖，还原糖在碱性 条件下加热被氧化成糖酸及其它产物，3,5二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基5- 基水杨酸。在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成一定比例关系，利用分 光光度计，在540m波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，可求出样品中还原糖和 总糖的含量。由于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖苷键需要加入一分子水，所以在计算 多糖含量时应垂以09 2.标准曲线应在坐标纸上绘制，横坐标轴距坐标纸底边1.5~2cm,标示出刻度和葡萄 糖的毫克数：纵坐标轴距坐标纸左边1.5~2cm,标示刻度和光密度值：曲线为过原点的直 线，测定点均匀分布在直线的两侧：标准曲线只能在测试条件完全相同的情况下，用于确 定样品中的物质含量。对于重复的测定，应取吸光度的平均值查标准曲线：测定数据不应 记在标准曲线上。 (任大明)6 六、附 注 1． 离心时对称位置的离心管必须配平。 2． 标准曲线制作与样品测定应同时进行显色，并使用同一空白调零点和比色。 3． 面粉中还原糖含量较少，计算总糖时可将其合并入多糖一起考虑。 七、思考题 1．3,5-二硝基水杨酸比色法是如何对总糖进行测定的? 2．如何正确绘制和使用标准曲线? 参考答案 1．植物中的总糖包括单糖、寡糖和多糖，单糖是还原糖，可直接测定。而没有还原 性的寡糖和多糖，需用高浓度的酸在加热的条件下水解成有还原性的单糖，还原糖在碱性 条件下加热被氧化成糖酸及其它产物，3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的 3-氨基-5-硝 基水杨酸。在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成一定比例关系，利用分 光光度计，在 540nm 波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，可求出样品中还原糖和 总糖的含量。由于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖苷键需要加入一分子水，所以在计算 多糖含量时应乘以 0.9。 2．标准曲线应在坐标纸上绘制，横坐标轴距坐标纸底边 1.5~2cm，标示出刻度和葡萄 糖的毫克数；纵坐标轴距坐标纸左边 1.5~2cm，标示刻度和光密度值；曲线为过原点的直 线，测定点均匀分布在直线的两侧；标准曲线只能在测试条件完全相同的情况下，用于确 定样品中的物质含量。对于重复的测定，应取吸光度的平均值查标准曲线；测定数据不应 记在标准曲线上。 （任大明） 查曲线所得水解后还原糖毫克数 稀释倍数 总糖（%）= 样品毫克数 0.9 100