正在加载图片...
号管的光密度值。以光密度值为纵坐标,葡萄糖含量(g)为横坐标,在坐标纸上绘出标 曲线。 2.样品中还原糖和总糖的测定 (1)还原糖的提取 准确称取3.00g食用面粉,放入100mL烧杯中,先用少量蒸馏水调成糊状,然后加入 50mL蒸馏水,搅匀,置于50℃恒温水浴中保温20min,使还原糖浸出。将浸出液(含沉 淀)转移到50mL离心管中,于4000rmin下离心5min,沉淀可用20mL蒸馏水洗一次, 再离心,将二次离心的上清液收集在100mL容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度,混匀,作 为还原糖待测液。 (2)总糖的水解和提取 准确称取1.00g食用面粉,放入100mL三角瓶中,加15mL蒸馏水及10mL6MHCI 置沸水浴中加热水解30mn(水解是否完全可用碘-碘化钾溶液检查)。待三角瓶中的水解 液冷却后,加入1滴酚酞指示剂,用6 mol/LNaOH中和至微红色,用蒸馏水定容在100ml 容量瓶中,混匀。将定容后的水解液过滤,取滤液10mL,移入另一100mL容量瓶中定容, 混匀,作为总糖待测液。 (3)显色和比色 取4支20mL具塞刻度试管,编号,按表2所示分别加入待测液和显色剂,空白调零 可使用制作标准曲线的0号管。加热、定容和比色等其余操作与制作标准曲线相同。 表2样品还原糖测定 还原糖待测液总糖待测液蒸馏水DNS 查曲线萄萄糖量 管号 光密度值 (mL.) (mL) (mL) (mL)(0D540m) (mg) 03 0.5 1.5 9 1 1 1.5 10 1 15 五、结果与计算: 计算出7、8号管光密度值的平均值和9、10管光密度值的平均值,在标准曲线上分 别查出相应的还原糖毫克数,按下式计算出样品中还原糖和总糖的百分含量。 提取液总体积 查曲线所得葡萄糖毫克数 测定时取用体积 还原糖(%)= 样品毫克数 100 5 号管的光密度值。以光密度值为纵坐标,葡萄糖含量(mg)为横坐标,在坐标纸上绘出标 准曲线。 2. 样品中还原糖和总糖的测定 (1)还原糖的提取 准确称取 3.00g 食用面粉,放入 100mL 烧杯中,先用少量蒸馏水调成糊状,然后加入 50mL 蒸馏水,搅匀,置于 50℃恒温水浴中保温 20min,使还原糖浸出。将浸出液(含沉 淀)转移到 50mL 离心管中,于 4 000r/min 下离心 5min,沉淀可用 20mL 蒸馏水洗一次, 再离心,将二次离心的上清液收集在 100mL 容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度,混匀,作 为还原糖待测液。 (2)总糖的水解和提取 准确称取 1.00g 食用面粉,放入 100mL 三角瓶中,加 15mL 蒸馏水及 10mL 6M HCl, 置沸水浴中加热水解 30min(水解是否完全可用碘-碘化钾溶液检查)。待三角瓶中的水解 液冷却后,加入 1 滴酚酞指示剂,用 6mol/LNaOH 中和至微红色,用蒸馏水定容在 100mL 容量瓶中,混匀。将定容后的水解液过滤,取滤液 10mL,移入另一 100mL 容量瓶中定容, 混匀,作为总糖待测液。 (3)显色和比色 取 4 支 20mL 具塞刻度试管,编号,按表 2 所示分别加入待测液和显色剂,空白调零 可使用制作标准曲线的 0 号管。加热、定容和比色等其余操作与制作标准曲线相同。 表 2样品还原糖测定 管 号 还原糖待测液 (mL) 总糖待测液 (mL) 蒸馏水 (mL) DNS (mL) 光密度值 (OD540nm) 查曲线葡萄糖量 (mg) 7 0.5 1.5 1.5 8 0.5 1.5 1.5 9 1 1 1.5 10 1 1 1.5 五、结果与计算: 计算出 7、8 号管光密度值的平均值和 9、10 管光密度值的平均值,在标准曲线上分 别查出相应的还原糖毫克数,按下式计算出样品中还原糖和总糖的百分含量。 提取液总体积 查曲线所得葡萄糖毫克数 测定时取用体积 还原糖(%)= 样品毫克数 100
<<向上翻页向下翻页>>
©2008-现在 cucdc.com 高等教育资讯网 版权所有