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(5)容量瓶:100mL3 (6)刻度吸管:1mL1:2mL2:10mL1 (7)恒温水浴锅 (8)沸水浴 (9)离心机 (10)扭力天平 (11)分光光度计 3.试剂 (1)1mgmL葡萄糖标准液 准确称取80℃烘至恒重的分析纯葡萄糖100mg,置于小烧杯中,加少量蒸馏水溶解后, 转移到100mL容量瓶中,用蒸馏水定容至100mL,混匀,4℃冰箱中保存备用。 (2)3,5.二硝基水杨酸(DNS)试剂 将63gDNS和262mL2 M NaOH溶液,加到500mL含有185g酒石酸钾钠的热水溶液 中,再加5g结品酚和5g亚硫酸钠,搅拌溶解,冷却后加蒸馏水定容至1000mL,贮于标 色瓶中备用 (3)碘-碘化钾溶液:称取5g碘和10g碘化钾,溶于100mL蒸馏水中。 (4)酚酞指示剂:称取0.1g酚酞,溶于250mL70%乙醇中。 (5)6MHC1和6 M NaOH各100mL。 四、操作步骤 1.制作葡萄糖标准曲线 取7支20mL具塞刻度试管编号,按表1分别加入浓度为1mgmL的葡萄糖标准液、 蒸馏水和3,5二硝基水杨酸(DNS)试剂,配成不同葡萄糖含量的反应液。 表1葡萄糖标准曲线制作 管号 1mgmL葡萄糖标准液 蒸馏水 DNS 葡萄糖含量 光密度值 (mL) (mL) (mL) (mg) (ODs40m) 0 0 2 1.5 0 1 0.2 1.8 1.5 0.2 0.4 1.5 0.4 3 0.6 1.4 1.5 0.6 0.8 12 1.5 0.8 5 1.0 1.0 1.5 1.0 6 12 0.8 15 12 将各管摇匀,在沸水浴中准确加热5min,取出,冷却至室温,用蒸馏水定容至20mL, 加寨后颠倒混匀,在分光光度计上进行比色。调波长540m,用0号管调零点,测出164 (5)容量瓶:100mL 3 (6)刻度吸管:1mL 1;2mL 2;10mL 1 (7)恒温水浴锅 (8)沸水浴 (9)离心机 (10)扭力天平 (11)分光光度计 3. 试剂 (1)1mg/mL 葡萄糖标准液 准确称取 80℃烘至恒重的分析纯葡萄糖 100mg,置于小烧杯中,加少量蒸馏水溶解后, 转移到 100mL 容量瓶中,用蒸馏水定容至 100mL,混匀,4℃冰箱中保存备用。 (2)3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂 将 6.3g DNS 和 262mL 2M NaOH 溶液,加到 500mL 含有 185g 酒石酸钾钠的热水溶液 中,再加 5g 结晶酚和 5g 亚硫酸钠,搅拌溶解,冷却后加蒸馏水定容至 1000mL,贮于棕 色瓶中备用。 (3)碘-碘化钾溶液:称取 5g 碘和 10g 碘化钾,溶于 100mL 蒸馏水中。 (4)酚酞指示剂:称取 0.1g 酚酞,溶于 250mL 70%乙醇中。 (5)6M HCl 和 6M NaOH 各 100mL。 四、操作步骤 1. 制作葡萄糖标准曲线 取 7 支 20mL 具塞刻度试管编号,按表 1 分别加入浓度为 1mg/mL 的葡萄糖标准液、 蒸馏水和 3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂,配成不同葡萄糖含量的反应液。 表 1葡萄糖标准曲线制作 管 号 1mg/mL 葡萄糖标准液 (mL) 蒸馏水 (mL) DNS (mL) 葡萄糖含量 (mg) 光密度值 (OD540nm) 0 0 2 1.5 0 1 0.2 1.8 1.5 0.2 2 0.4 1.6 1.5 0.4 3 0.6 1.4 1.5 0.6 4 0.8 1.2 1.5 0.8 5 1.0 1.0 1.5 1.0 6 1.2 0.8 1.5 1.2 将各管摇匀,在沸水浴中准确加热 5min,取出,冷却至室温,用蒸馏水定容至 20mL, 加塞后颠倒混匀,在分光光度计上进行比色。调波长 540nm,用 0 号管调零点,测出 1~6
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