碳水化合物 实验一还原糖和总糖的测定 3,5-二硝基水杨酸比色法 一、目的 紫握还原糖和总糖测定的基本原理，学习出色法定还原糖的操作方法和分光光度计 的使用。 二、原理 还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，单 糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，其中乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是 利用糖的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取 没有还 可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定，再分别求 出样品中还原糖和总糖的含量（还原糖以葡萄糖含量计）。 还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物，3,5二硝基水杨酸则被还原为棕 红色的3氨基5-硝基水杨酸。在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比 关系，利用分光光度计，在540m波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，便可求出 样品中还原糖和总糖的含量。由于多糖水解为单糖时，每斯裂 一个糖苷键需加入一分子水 所以在计算多糖含量时应乘以0.9。 COOH COOH H OH 加热 还原糖 碱性 +糖酸 NO2 02N NH2 3,5二硝基水杨酸（黄色） 3-氨基-5-硝基水杨酸（棕红色） 三、实验材料、主要仪器和试剂 1.实验材料 小麦面粉：精密pH试纸 2.主要仪器 (1)具塞玻璃刻度试管：20mL11 (2)大离心管：50m (3)烧杯：100mL】 (4)三角瓶：100mL1 3 碳水化合物 实验一 还原糖和总糖的测定 3,5-二硝基水杨酸比色法 一、目的 掌握还原糖和总糖测定的基本原理，学习比色法测定还原糖的操作方法和分光光度计 的使用。 二、原理 还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，单 糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，其中乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是 非还原糖。利用糖的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来，对 没有还原性的双糖和多糖，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定，再分别求 出样品中还原糖和总糖的含量（还原糖以葡萄糖含量计）。 还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物，3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕 红色的 3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比 关系，利用分光光度计，在 540nm 波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，便可求出 样品中还原糖和总糖的含量。由于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖苷键需加入一分子水， 所以在计算多糖含量时应乘以 0.9。 COOH OH O2N NO2 3,5-二硝基水杨酸（黄色） 还原糖 COOH OH O2N NH2 加 热 碱 性 糖 酸 3-氨基-5-硝基水杨酸（棕红色） + + 三、实验材料、主要仪器和试剂 1． 实验材料 小麦面粉；精密 pH 试纸。 2． 主要仪器 （1）具塞玻璃刻度试管：20mL 11 （2）大离心管：50mL 2 （3）烧杯：100mL 1 （4）三角瓶：100mL 1