第十章天然药物化学实验 5 胶自然下沉，液面保持在硅胶之上，硅胶柱中不得有气泡。加样前，液面高度要保 持在10-20mm左右。 3.加入待分离样品 (1)方法1：一般将样品溶液溶于少量初始的洗脱剂中，制成样品溶液，轻轻注 入已准各好的硅胶柱上面，勿使柱面受到扰动，否则影响色谱效果 (2)方法山：如样品不溶于初始的洗脱剂，则将样品溶于挥发性的溶剂（如甲醇、 丙酮等)中，然后取少量吸附剂与其拌匀，除尽溶剂，再将含有样品的吸附剂均匀地 加入到色谱柱的顶端，再覆盖上少量保护硅胶或脱脂棉、小玻璃球将其压住，以防 洗脱时神乱顶部的拌样硅胶。 4.选择及配制洗脱剂。 5.洗脱与接收：将洗脱剂置于色谱柱最上面安装好的分液漏斗中。打开色谱柱 下端活塞，然后打开分液漏斗活塞滴加洗脱剂开始洗脱并接收，洗脱时要始终保持 洗脱剂液面在样品层之上，洗脱剂流速保持在1~2滴/秒左右。等份收集洗脱液， 一般先选用洗脱能力弱的溶剂，然后逐步增加洗脱能力（图103）。 6.配合TLC或其他方法即时检查洗脱液（即：接收液）。 滴液漏斗 e●000●000●0●0。●Z ●●●●●●少量硅胶或脂棉一 玻璃色谐柱 一色谱硅胶 脱脂棉 洗脱液 图10-3硅胶色谱分离装置示意图 (二)注意事项 1.硅胶吸附拌样的比例约为：样品：硅胶=1：1或1：2。 2.吸附剂硅胶的使用量比例约为：样品：硅胶=1：30-60或1：100（难分离物）。 3.洗脱剂的极性选择要合适，否则得不到很好的分离。 4.洗脱的速度要合适，一般保持在2~5ml/min 四、离子交换柱色谱分离技术(Ion Exchange 第十章 天然药物化学实验 5 胶自然下沉，液面保持在硅胶之上，硅胶柱中不得有气泡。加样前，液面高度要保 持在 10~20 mm 左右。 3. 加入待分离样品 (1) 方法 I：一般将样品溶液溶于少量初始的洗脱剂中，制成样品溶液，轻轻注 入已准备好的硅胶柱上面，勿使柱面受到扰动，否则影响色谱效果。 (2) 方法 II：如样品不溶于初始的洗脱剂，则将样品溶于挥发性的溶剂(如甲醇、 丙酮等)中，然后取少量吸附剂与其拌匀，除尽溶剂，再将含有样品的吸附剂均匀地 加入到色谱柱的顶端，再覆盖上少量保护硅胶或脱脂棉、小玻璃球将其压住，以防 洗脱时冲乱顶部的拌样硅胶。 4. 选择及配制洗脱剂。 5. 洗脱与接收：将洗脱剂置于色谱柱最上面安装好的分液漏斗中。打开色谱柱 下端活塞，然后打开分液漏斗活塞滴加洗脱剂开始洗脱并接收，洗脱时要始终保持 洗脱剂液面在样品层之上，洗脱剂流速保持在 1～2 滴/秒左右。等份收集洗脱液， 一般先选用洗脱能力弱的溶剂，然后逐步增加洗脱能力(图 10-3)。 6. 配合 TLC 或其他方法即时检查洗脱液(即：接收液)。 色谱硅胶 样品 洗脱剂液面 洗脱剂 少量硅胶或脱脂棉 脱脂棉 洗脱液 玻璃色谱柱 滴液漏斗 接收瓶 图 10-3 硅胶色谱分离装置示意图 (二)注意事项 1. 硅胶吸附拌样的比例约为：样品:硅胶=1:1 或 1:2。 2. 吸附剂硅胶的使用量比例约为：样品:硅胶=1:30~60 或 1:100(难分离物)。 3. 洗脱剂的极性选择要合适，否则得不到很好的分离。 4. 洗脱的速度要合适，一般保持在 2~5 ml/min。 四、离子交换柱色谱分离技术(Ion Exchange