生物学 选择性必修3生物技术与工程 配人教版 在烧杯中滴尽，然后再放在火焰上灼烧。不要将过热的 特别提醒 涂布器放在盛有酒精的烧杯中，以免引燃酒精。 对照组的设置原则 3.微生物的筛选。 (1)判断培养基中“是否有杂菌污染”，需将未接种的 (1)选择培养基的设计思路。 培养基同时进行培养。 ①利用营养缺陷型选择培养基进行选择培养：通过控制 (2)判断选择培养基“是否具有筛选作用”，需设 培养基的营养成分，使营养缺陷型微生物不能正常生长。 置牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养，观察两种培 ②利用化学物质进行选择培养：在完全培养基中加入某 养基上的菌落数目，进行对比得出结论。 些化学物质，利用加入的化学物质抑制某些微生物的生长， 司时选择所需要的微生物。 ”情境体验 ③利用培养条件进行选择培养：改变微生物的培养 测定饮用水中细菌、病毒的含量是有效监控部分疾病发 条件（如高温、特殊pH等），筛选特定的微生物。 生的必要措施。某同学想利用所学知识调查本地饮用水质 (2)实例：筛选分解尿素或纤维素的细菌。 量是否合格，特别是大肠杆菌的数目是否超标，应该用平板 若选择培养基的氮源只有尿素，只有能合成脲酶的细菌 划线法还是稀释涂布平板法？请说明理由。 才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的细菌由于不能 提示稀释涂布平板法。平板划线法只有最后一次划线 分解尿素，缺乏氮源而受到抑制，所以用此培养基就能够选 择出分解尿素的细菌。 的末端才会形成只由一个微生物形成的菌落，最开始划线的区 同理，若选择培养基中只有纤维素作碳源，只有能利用 域微生物很可能长成一片，导致无法计数。此外，灼烧接种环 纤维素的细菌才能生存，其他微生物的生长则受到抑制。 的时候也会杀死一部分微生物。稀释涂布平板法是按照一定 特别提醒「 浓度梯度稀释样品，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生 (1)在培养基中加入酚红指示剂可以鉴别 长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计 分解尿素的细菌。如果指示剂变红，说明该种细菌能分 平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 解尿素。 典例剖析 (2)在培养基中加入刚果红可以鉴别分解纤维素的 细菌。如果培养基中出现以这些细菌为中心的透明图， 平板划线法和稀释涂布平板法是两种常用的接种方法。 说明该种细菌能分解纤维素。 下列相关叙述错误的是() A.平板划线法要求连续多划几次，且除了第一次划线 4.统计菌落数目的方法。 外，每一次划线的起点都是上一次划线的终点 间接计数法 直接计数法 B.第一次划线需要将接种环灼烧灭菌，以后的划线可 方法 (稀释涂布平板法) (显微镜直接计数法) 以不经灭菌直接划线 C.如果菌液本身浓度不高，则可以适当降低稀释倍数 当样品的稀释度足够高时， 利用特定的细菌计数 D.充分稀释和连续划线的目的都是使形成的菌落由单 培养基表面生长的一个单 板或血细胞计数板，在 的活菌繁殖而成 菌落，来源于样品稀释液中 显微镜下观察、计数， 答案B 原理 的一个活菌。通过统计平 然后再计算一定体积 板上的菌落数，就能推测出 的样品中微生物的 学以致用 样品中大约含有多少活菌 数量 用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对 应稀释倍数为1×10°的培养基中，得到以下几种统计结果， 正确的是() 每克样品中的菌数=(C: A.涂布了1个平板，统计的菌落数是230 V)XM B.涂布了2个平板，统计的菌落数分别是215和260. C为某稀释度下平板上生 取平均值238 公式 长的平均菌落数：V为涂布 C.涂布了3个平板，统计的菌落数分别是21、212和 平板时所用的稀释液的体 256,取平均值163 积(mL);M为稀释倍数 D.涂布了3个平板，统计的菌落数分别是210、240和 250,取平均值233 当两个或多个细胞连在 答案D 缺点 起时，平板上观察到的只是 不能区分活菌和死菌 解析在设计实验时，每个稀释度一定要至少涂布3个 个菌落 平板作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性，所以A、 B两项错误。C项虽涂布了3个平板，但是其中1个平板的 结果 比实际值偏小 比实际值偏大 计数结果与另外2个相差太大，说明在操作过程中可能出现 了误差，因此，不能简单地用3个平板的计数值求平均值，C 项错误，D项正确。生物学 选择性必修3 生物技术与工程 配人教版 在烧杯中滴尽,然后再放在火焰上灼烧。不要将过热的 涂布器放在盛有酒精的烧杯中,以免引燃酒精。 3.微生物的筛选。 (1)选择培养基的设计思路。 ①利用营养缺陷型选择培养基进行选择培养:通过控制 培养基的营养成分,使营养缺陷型微生物不能正常生长。 ②利用化学物质进行选择培养:在完全培养基中加入某 些化学物质,利用加入的化学物质抑制某些微生物的生长, 同时选择所需要的微生物。 ③利用培养条件进行选择培养:改变微生物的培养 条件(如高温、特殊pH 等),筛选特定的微生物。 (2)实例:筛选分解尿素或纤维素的细菌。 若选择培养基的氮源只有尿素,只有能合成脲酶的细菌 才能分解尿素,以尿素作为氮源。缺乏脲酶的细菌由于不能 分解尿素,缺乏氮源而受到抑制,所以用此培养基就能够选 择出分解尿素的细菌。 同理,若选择培养基中只有纤维素作碳源,只有能利用 纤维素的细菌才能生存,其他微生物的生长则受到抑制。 (1)在培养基中加入酚红指示剂可以鉴别 分解尿素的细菌。如果指示剂变红,说明该种细菌能分 解尿素。 (2)在培养基中加入刚果红可以鉴别分解纤维素的 细菌。如果培养基中出现以这些细菌为中心的透明圈, 说明该种细菌能分解纤维素。 4.统计菌落数目的方法。 方法 间接计数法 (稀释涂布平板法) 直接计数法 (显微镜直接计数法) 原理 当样品的稀释度足够高时, 培养基表面生长的一个单 菌落,来源于样品稀释液中 的一个活菌。通过统计平 板上的菌落数,就能推测出 样品中大约含有多少活菌 利用特定的细菌计数 板或血细胞计数板,在 显微镜下 观 察、计 数, 然后再计算一定体积 的 样 品 中 微 生 物 的 数量 公式 每克样品中的菌数=(C÷ V)×M C 为某稀释度下平板上生 长的平均菌落数;V 为涂布 平板时所用的稀释液的体 积(mL);M 为稀释倍数 — 缺点 当两个或多个细胞连在一 起时,平板上观察到的只是 一个菌落 不能区分活菌和死菌 结果 比实际值偏小 比实际值偏大 对照组的设置原则 (1)判断培养基中“是否有杂菌污染”,需将未接种的 培养基同时进行培养。 (2)判断选择培养基“是否具有筛选作用”,需设 置牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养,观察两种培 养基上的菌落数目,进行对比得出结论。 测定饮用水中细菌、病毒的含量是有效监控部分疾病发 生的必要措施。某同学想利用所学知识调查本地饮用水质 量是否合格,特别是大肠杆菌的数目是否超标,应该用平板 划线法还是稀释涂布平板法? 请说明理由。 提示 稀释涂布平板法。平板划线法只有最后一次划线 的末端才会形成只由一个微生物形成的菌落,最开始划线的区 域微生物很可能长成一片,导致无法计数。此外,灼烧接种环 的时候也会杀死一部分微生物。稀释涂布平板法是按照一定 浓度梯度稀释样品,当样品的稀释度足够高时,培养基表面生 长的一个单菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计 平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。 典例剖析 平板划线法和稀释涂布平板法是两种常用的接种方法。 下列相关叙述错误的是( ) A.平板划线法要求连续多划几次,且除了第一次划线 外,每一次划线的起点都是上一次划线的终点 B.第一次划线需要将接种环灼烧灭菌,以后的划线可 以不经灭菌直接划线 C.如果菌液本身浓度不高,则可以适当降低稀释倍数 D.充分稀释和连续划线的目的都是使形成的菌落由单 一的活菌繁殖而成 答案 B 学以致用 用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数,在对 应稀释倍数为1×106 的培养基中,得到以下几种统计结果, 正确的是( ) A.涂布了1个平板,统计的菌落数是230 B.涂布了2个平板,统计的菌落数分别是215和260, 取平均值238 C.涂布了3个平板,统计的菌落数分别是21、212和 256,取平均值163 D.涂布了3个平板,统计的菌落数分别是210、240和 250,取平均值233 答案 D 解析 在设计实验时,每个稀释度一定要至少涂布3个 平板作为重复组,才能增强实验的说服力与准确性,所以 A、 B两项错误。C项虽涂布了3个平板,但是其中1个平板的 计数结果与另外2个相差太大,说明在操作过程中可能出现 了误差,因此,不能简单地用3个平板的计数值求平均值,C 项错误,D项正确。 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 12