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①酰化试剂:苄氧酰氯、叔丁氧甲酰氯、苯二甲酸酐、对-甲苯磺酰氯。这些酰化剂在多肽和蛋白质的人工合成中被 用作氨基保护剂 ②丹磺酰氯(DNSc,5-二甲基氨基萘-1-磺酰氯) DNS—c可用于多肽链NH2末端氨基酸的标记和微量氨基酸的定量测定 图 NGy-Aa- -Ser-LeurPhe C→→→→DNs- Gly-Ala- Ser-LeurPhe C 水解DNS-、Ala、Ser、Leu、Phe DNS-氨基酸在紫外光激发后发黄色荧光 ③蛋白质的合成 图 ④(生物体内)在酶和ATP存在条件下,羧酸也可与氨基酸的氨基作用,形成酰基化产物。 苯甲酸与Gly的氨基的酰基化反应是生物体内解毒作用的一个典型的例子 将经过匀浆的动物肝脏组织与Gy、苯甲酸和ATP混合保温,从混合液中可分离出N苯甲酸·Gy。 苯甲酸是食品防腐剂,在生物体内转变成N苯甲酰Gy后,可经尿排出 2、烷基化反应 a-氨基中的氮是一个亲核中心,能发生亲核取代反应。 ①肌氨酸是存在于生物组织中重要的组分,它是Gy甲基化的产物 图 ②强亲电的有机物能与αNH2发生烷基化反应 第一次大战中使用的芥子气,它的主要作用是使氨基酸的α-氨基烷基化,从而破坏蛋白质的正常功能。 图 ③ Sanger反应(24一二硝基氟苯,DNP) 二硝基苯基氨基酸(DNP氨基酸),黄色,层析法鉴定,被 Sanger用来测定多肽的N末端氨基酸。 ④ Edman反应(苯异硫氰酸酯,PIIC) 图 苯氨基硫甲酰衍生物(PIC-氨基酸)→苯乙内酰硫脲衍生物(PIH-氨基酸) PIH-氨基酸,无色,可以用层析法分离鉴定。被 Edman用来鉴定多肽的NH2末端氨基酸 氨基酸的α氨基与醛类反应,生成西佛碱。 图 西佛碱是某些酶促反应的中间产物(如转氨基反应的中间产物)。 ⑥含硫氨基酸的烷基化反应 硫原子也是亲核中心,可发生亲核取代反应。 生物体内,最重要的甲基化剂是S-腺苷甲硫氨酸(SAM),是由Mt与AIP作用得到的S-烷基化产物 图 在酶催化下,SAM可以使多种生物分子的氨基甲基化,如磷脂酰胆碱的生物合成。10 ①酰化试剂:苄氧酰氯、叔丁氧甲酰氯、苯二甲酸酐、对-甲苯磺酰氯。这些酰化剂在多肽和蛋白质的人工合成中被 用作氨基保护剂。 ②丹磺酰氯(DNS-cl,5—二甲基氨基萘-1-磺酰氯) DNS—cl可用于多肽链—NH2末端氨基酸的标记和微量氨基酸的定量测定。 图 N Gly—Ala—Ser—Leu—Phe C →→→→ DNS—Gly—Ala—Ser—Leu—Phe C 水解 DNS—Gly、 Ala、 Ser、 Leu、 Phe DNS-氨基酸在紫外光激发后发黄色荧光。 ③蛋白质的合成 图 ④(生物体内)在酶和ATP存在条件下,羧酸也可与氨基酸的氨基作用,形成酰基化产物。 苯甲酸与Gly 的氨基的酰基化反应是生物体内解毒作用的一个典型的例子。 将经过匀浆的动物肝脏组织与Gly、苯甲酸和ATP混合保温,从混合液中可分离出N-苯甲酸一Gly。 图 苯甲酸是食品防腐剂,在生物体内转变成N-苯甲酰-Gly 后,可经尿排出。 2、烷基化反应 α-氨基中的氮是一个亲核中心,能发生亲核取代反应。 ①肌氨酸是存在于生物组织中重要的组分,它是Gly甲基化的产物: 图 ②强亲电的有机物能与α-NH2发生烷基化反应。 第一次大战中使用的芥子气,它的主要作用是使氨基酸的α-氨基烷基化,从而破坏蛋白质的正常功能。 图 ③Sanger 反应(2.4一二硝基氟苯,DNFP) 图 二硝基苯基氨基酸(DNP-氨基酸),黄色,层析法鉴定,被Sanger 用来测定多肽的NH2末端氨基酸。 ④Edman反应(苯异硫氰酸酯,PITC) 图 苯氨基硫甲酰衍生物(PTC-氨基酸) → 苯乙内酰硫脲衍生物(PTH-氨基酸) PTH-氨基酸,无色,可以用层析法分离鉴定。被Edman 用来鉴定多肽的NH2末端氨基酸 ⑤生成西佛碱的反应(Schiff) 氨基酸的α氨基与醛类反应,生成西佛碱。 图 西佛碱是某些酶促反应的中间产物(如转氨基反应的中间产物)。 ⑥含硫氨基酸的烷基化反应 硫原子也是亲核中心,可发生亲核取代反应。 生物体内,最重要的甲基化剂是S-腺苷甲硫氨酸(SAM),是由Met 与ATP作用得到的S-烷基化产物。 图 在酶催化下,SAM 可以使多种生物分子的氨基甲基化,如磷脂酰胆碱的生物合成
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