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均能生长的主平板(含完全培养基)上,经培养后形成单菌落(图8-9): ②通过一消毒的“印章”(直径略小于培养皿底,表面包有丝绒布,使其尽 量平整)将A平板的菌落分别原位转移(或印迹)到C平板(含有与A平板相同的营 养成份)和D平板(不含缺陷型所需的营养因子,即基本培养基) ③经培养后对照观察c和d平板上形成的单菌落,如果在c平板上长而在d 平板上不长的,则为所需分离的突变型: ④在c平板上挑取d平板上不长的相应位置的单菌落,并进一步在完全培养 基上划线分离纯化。 (2)抗性突变型 由于基因突变使菌株对某种或某几种药物,特别是抗生索,产生抗性的一种 突变,普遍存在于各类细菌中,也是用来筛选重组子和进行其它遗传学研究的重 要正选择标记。在加有相应抗生素的平板上,只有抗性突变株能生长。所以很容 易分离得到。 (3)发酵突变型 指从能够利用到不能利用某种营养物质的突变型。如野生型大肠杆菌可以发 酵乳糖,但也能分离到不能发酵乳糖的突变体,可以利用鉴别培养基呈现的反应 进行检测。 (4)毒力突变型 突变后致病能力增强或减弱的突变型。 (5)产量突变型 产生某种代谢产物的能力增强或减弱的突变型。 3.条件致死突变型 是指在某一条件下具有致死效应,而在另一条件下没有致死效应的突变型。 类因为这类基因一旦发生突变是致死的(例如为DA复制所必需的基因)。常用的 条件致死突变是温度敏感突变,用ts(temperature sensitive),表示,这类突 变在高温下(如42℃)是致死的,但可以在低温(如25-30℃)下得到这种突变。筛 选ts突变型的方法也是采用影印平板法,所不同的是教材中图8-9中的三个平 板上培养基相同,均可生长。只是将C和D平板分别置低温(30℃)和高温(42℃) 下培养,然后在C平板上挑取相应于D平板上未生长的菌落
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