第二节：蛋白质的大规模分离鉴定技术 例八一、蛋白质二维电泳-质谱技术 (一)蛋白质二维电泳技术 根据蛋白质的等电点和分子质量的差异，连续进行成垂直方向的两次电泳将其分离。 二维电泳一次可以分离几千个蛋白质。用固定化pH梯度(immobilized pH gradient, PG)干胶条代替两性电解质，加上与干胶条相配套的电泳仪进行第一向等电聚焦， 不仅极大提高了电泳的分辨率，也提高了结果的可重复性。 First Dimension: Second Dimension: Denaturing isoelectric SDS polyacrylamide focusing in presence gel electrophoresis of urea.Nonidet NP-40 gel rod rebuttered in SDS buffer In discontinuous gradient gel in vertical gel rod sample oH 3 pH 10 PH 10 PH 3 Separation acc.to Separation acc.to Isoelectric Points (charge) Molecular Weight(mass) 5一、蛋白质二维电泳-质谱技术 第二节：蛋白质的大规模分离鉴定技术 5 （一）蛋白质二维电泳技术 根据蛋白质的等电点和分子质量的差异，连续进行成垂直方向的两次电泳将其分离。 二维电泳一次可以分离几千个蛋白质。用固定化pH梯度(immobilized pH gradient, IPG) 干胶条代替两性电解质，加上与干胶条相配套的电泳仪进行第一向等电聚焦， 不仅极大提高了电泳的分辨率，也提高了结果的可重复性