河南师范大学 6.4其他吸光光度法和光度分析法的应用 6.4.1示差吸光光度法 1.原理（高浓度示差吸光光度法） 选用比cx浓度稍小的c为参比，调透光率100%，相当于标尺扩大10倍。 么=EC8到=4m=AM=4-4=b6-6)=6bac=6cw定量基瑞：AM=6b(化-6)=6bac a.先做△A-Ac标准曲线：b.测待测溶液的△A:c.从标准曲线查出相应的△c:d.cx=cO+△c 设普通光度法和示差光度法的测量误差为x%普通光度法结果：G,±C,·x%,示差光度法结 果：c±(c-a)% 6.4.2双波长吸光光度法 1.原理：当没有合适的参比溶液时可选择双波长吸光光度法；广泛运用于环境试样和生物 试样的分析 2.应用：(1)混浊试液中组分的测定：(2)单组分的测定：(3)两组分共存时的分别测定。 6.4.3酸（碱）离解常数的测定 HB H*+B 在某波长入下，测量溶液吸光度（设酸HB和碱B均有吸收，液层厚度b=1cm)则 cw[H:】 A=HB]+s[B]=eK,+H问sK,+H阿 AHw=EHBC,Ag=Erc→pK。=plH-lg (A-A-) 6.4.4络合物组成的测定 (1)饱和法（又称摩尔比法） (2)连续变化法（又称等摩尔系列法） 固定一种组分（通常是金 CMCRFC,改变cM和cR的相对量， 属离子M0的浓度，改变络合 配制一系列溶液，在有色络合物 剂（®）的浓度，得到一系列 的最大吸收波长处测量这一系列 [R]/0比值不同的溶液， 溶液的吸光度。当溶液中络合物 并配制相应的试剂空白作 Rn浓度最大时，cRcW比值为n。 参比液，分别测定其吸光度。 当cc为0.5时，络合比为1：1： 以吸光度A为纵坐标，[R]/M)为横坐标作图 当cc为0.33，络合比为1：2 0.5 0.4 8 0.1 [RVIM) "m848888 0.0 图6一16饱和法 图6一17生续变化法 作业：P3,5,6Pa98,11,12P2015,17,19 6-4 河南师范大学 6.4 其他吸光光度法和光度分析法的应用 6.4.1示差吸光光度法 1．原理(高浓度示差吸光光度法) 选用比cx浓度稍小的c0为参比,调透光率100%,相当于标尺扩大10倍。 } 0 0 ( ) ( ) 0 0 0 , x x x x x A cb A A A A b c c b c bc A bc c bc A cb ε ε εε ε ε = ⇒ = Δ = − = − == Δ = Δ= − = Δ = 相对 相对 定量基础： ε x a.先做ΔA~Δc 标准曲线；b.测待测溶液的ΔA；c.从标准曲线查出相应的Δc；d.cx=c0+ Δc 设普通光度法和示差光度法的测量误差为 x%普通光度法结果：c c x x ± ⋅ % ±−⋅ c x ，示差光度法结 果：c c x x ( ) 0 % 6.4.2 双波长吸光光度法 1．原理：当没有合适的参比溶液时可选择双波长吸光光度法；广泛运用于环境试样和生物 试样的分析 2．应用：（1）混浊试液中组分的测定；（2）单组分的测定；（3）两组分共存时的分别测定。 6.4.3 酸（碱）离解常数的测定 HB = H+ + B－ 在某波长λ下，测量溶液吸光度（设酸HB和碱B－ 均有吸收，液层厚度b=1cm）则 [ ] [] [ ] [ ] [ ] ( ) ( ) , l HB HB a HB B B HB a a HB HB HB B B a B c H c K A HB B KH KH A A A c A c pK pH A A ε εε ε ε ε − − − − − + − + + = += + + + − = = ⇒ =− − g 6.4.4 络合物组成的测定 （1）饱和法(又称摩尔比法) （2）连续变化法(又称等摩尔系列法) 固定一种组分(通常是金 cM+cR=c，改变 cM和 cR 的相对量， 属离子 M)的浓度，改变络合 配制一系列溶液，在有色络合物 剂(R)的浓度，得到一系列 的最大吸收波长处测量这一系列 [R]/[M]比值不同的溶液， 溶液的吸光度。当溶液中络合物 并配制相应的试剂空白作 MRn 浓度最大时，cR/cM 比值为 n。 参比液，分别测定其吸光度。 当 cM/c 为 0.5 时，络合比为 1:1； 以吸光度 A 为纵坐标，[R]/[M]为横坐标作图。 当 cM/c 为 0.33，络合比为 1:2； 作业：P238 3, 5, 6 P239 8, 11, 12 P240 15, 17, 19 6－4