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%BB%E6%95%B0☑ 7http://www.shunz.net/tag/%E7%BA%BF%E6%80%A7%E7%9B%B8%E5%85%B3%E7%B3 %BB%E6%95%B0☑ 五、教学过程 1、学时分配:2学时 2、辅导手段:自习答疑 3、教学办法:讲授 4、板书设计:(见上页) 5、教学内容 第八章 蛋白质和氨基酸的测定 第二节蛋白质的定量测定 二、双缩脲法 传统的凯氏定氮法应用范围广,灵敏度高、准确,不要大仪器,但费时间,有环境污 染。 新开发的:双缩脲法、 紫外分光光度法、 染料结合法、 水杨酸比色法等。 1、原理 脲(尿素)NH2一C0一NH2加热至150160℃时,两分子缩和成双缩脲。 NH2-CO-NH2+NH2-CO-NH2 H2-CO-NH-CO-NH2+NH3 双缩脲能和硫酸铜的碱性溶液生成紫色络和物,这种反应叫双缩脲反应。(缩二脲反 应) 蛋白质分子中含有肽键一C0一NH一与双缩脲结构相似。在同样条件下也有呈色反 应,在一定条件下,其颜色深浅与蛋白质含量成正比,可用分光光度计来测其吸光度,确 定含量。(560nm)%BB%E6%95%B0/ 7http://www.shunz.net/tag/%E7%BA%BF%E6%80%A7%E7%9B%B8%E5%85%B3%E7%B3 %BB%E6%95%B0/ 五、教学过程 1、学时分配:2 学时 2、辅导手段:自习答疑 3、教学办法:讲授 4、板书设计: (见上页) 5、教学内容 第八章 蛋白质和氨基酸的测定 第二节 蛋白质的定量测定 二、双缩脲法 传统的凯氏定氮法应用范围广,灵敏度高、准确,不要大仪器,但费时间,有环境污 染。 新开发的:双缩脲法、 紫外分光光度法、 染料结合法、 水杨酸比色法等。 1、原理 脲(尿素)NH2—CO—NH2 加热至150~160℃时,两分子缩和成双缩脲。 NH2—CO—NH2 +NH2—CO—NH2 H2—CO—NH—CO—NH2 + NH3 双缩脲能和硫酸铜的碱性溶液生成紫色络和物,这种反应叫双缩脲反应。(缩二脲反 应) 蛋白质分子中含有肽键 —CO—NH— 与双缩脲结构相似。在同样条件下也有呈色反 应,在一定条件下,其颜色深浅与蛋白质含量成正比,可用分光光度计来测其吸光度,确 定含量。(560nm)
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