根据急性毒性试验的目的,受试动物给予受试物后,应即刻密切观察各组动 物发生的毒性反应(全身的或局部的)情况,中毒症状的特点和出现时间,中毒 症状恢复时间,动物发生中毒死亡的时间及死亡数,死亡动物必须的病理解剖检 査观察等。急性毒性试验一般不作病理组织学和化验检査,但是有时为了发现某 些脏器或靶器官的损害情况,或根据对一些受试物的特殊要求,亦可依据要求选 取有代表性的剂量组与对照组进行病理组织学显微镜检查和某些特异性指标的 化验检查。 试验的观察期限,如受试动物于接触受试物后24~48h内中毒死亡,未发现 有迟发中毒作用时,一般观察7~14d即可。否则应适当延长观察期限,直到中 毒症状基本恢复正常为止,延长观察需要2~4周。观察期限,特别要注意动物 的饲养和管理,以防止与受试物无关的意外死亡情况发生。 三、常用指标和毒性分级 (一)急性致死毒性实验常用指标 表示急性致死毒性最常用的指标是LDa,它是经过统计处理计算得出的数值 ,与LDo、LD等相比有更高的重现性;而且,它反映受试群体中大多数动物易 感性的平均情况,最后从剂量反应关系曲线上看,它处于曲线上升的中段,是致 死率对剂量变化最敏感的部位。但是,LDao只能表示一种外源化学物引起实验动 物死亡一半的剂量(或浓度),即只能表示动物一半死亡,一半存活的剂量点的 界限,所以是一个质化反应,而不能代表受试化合物的急性中毒特性,因此, 当注意到只用LDo(LCa)说明一个外源化学物的急性毒性是不够的。有时,根据 实际需要还应进行联合毒性实验等其它有关参数,并仔细观察动物的中毒症状。 1、LD的测定 测定LD常选用成年小鼠和大鼠两个种属,有时需选用其它种属。无特殊要 求,雌雄两性各半。在正式实验前,首先要了解受试化学物的化学结构和理化性 质,查阅有关文献,找出与受试化学物化学结构近似或有共性基团化学物的毒性 资料,确定预试剂量。预试一般每组4只动物,每次3组,以10倍为组距。根 据第一次预试结果判定需要增加还是降低剂量,组距保持不变,直至粗略预测到 LD1及LD为止。正式试验时一般每组10只动物(使用兔或狗等大动物时不少于 4~6只),在预测的LDo及LD之间安排5~7个剂量组,各剂量组间间距应根 据受试物毒性大小和预试结果而定,一般以0.65~0.85的等比级数为宜 LD值的计算有多种方法,大体上可以归纳为两大类,其一是死亡率一剂量 反应相关要求为正态分配的,其中概率单位图解法和寇氏法( Karber)较为常用。 另一类是不要求为正态分布的(非正态分布),计算时只查对有关表格即可得到 如何使用这些方法,应当按照受试化学物的具体情况分别对待。这里简要 介绍改进寇氏法( Karber)氏法,又称平均致死量法。适于此法的基本条件是, 要求每个染毒组实验动物数相同,至少5个实验组,死亡率呈正态分布,最低剂 量组死亡率小于20%,最髙剂量组死亡率高于80%,所选剂量对数差值相等。该 计算公式如下,首先求出 logLD及其95%的可信限,再求出LDao根据急性毒性试验的目的，受试动物给予受试物后，应即刻密切观察各组动 物发生的毒性反应（全身的或局部的）情况，中毒症状的特点和出现时间，中毒 症状恢复时间，动物发生中毒死亡的时间及死亡数，死亡动物必须的病理解剖检 查观察等。急性毒性试验一般不作病理组织学和化验检查，但是有时为了发现某 些脏器或靶器官的损害情况，或根据对一些受试物的特殊要求，亦可依据要求选 取有代表性的剂量组与对照组进行病理组织学显微镜检查和某些特异性指标的 化验检查。 试验的观察期限，如受试动物于接触受试物后 24～48h 内中毒死亡，未发现 有迟发中毒作用时，一般观察 7～14d 即可。否则应适当延长观察期限，直到中 毒症状基本恢复正常为止，延长观察需要 2～4 周。观察期限，特别要注意动物 的饲养和管理，以防止与受试物无关的意外死亡情况发生。 三、常用指标和毒性分级 （一）急性致死毒性实验常用指标 表示急性致死毒性最常用的指标是 LD50，它是经过统计处理计算得出的数值 ，与 LD100、LD0等相比有更高的重现性；而且, 它反映受试群体中大多数动物易 感性的平均情况，最后从剂量反应关系曲线上看，它处于曲线上升的中段, 是致 死率对剂量变化最敏感的部位。但是，LD50只能表示一种外源化学物引起实验动 物死亡一半的剂量(或浓度），即只能表示动物一半死亡，一半存活的剂量点的 界限，所以是一个质化反应，而不能代表受试化合物的急性中毒特性，因此，应 当注意到只用 LD50(LC50)说明一个外源化学物的急性毒性是不够的。有时，根据 实际需要还应进行联合毒性实验等其它有关参数，并仔细观察动物的中毒症状。 1、LD50的测定 测定 LD50常选用成年小鼠和大鼠两个种属，有时需选用其它种属。无特殊要 求，雌雄两性各半。在正式实验前，首先要了解受试化学物的化学结构和理化性 质，查阅有关文献，找出与受试化学物化学结构近似或有共性基团化学物的毒性 资料，确定预试剂量。预试一般每组 4 只动物，每次 3 组，以 10 倍为组距。根 据第一次预试结果判定需要增加还是降低剂量，组距保持不变，直至粗略预测到 LD100及 LD0为止。正式试验时一般每组 10 只动物（使用兔或狗等大动物时不少于 4～6 只），在预测的 LD100及 LD0之间安排 5～7 个剂量组，各剂量组间间距应根 据受试物毒性大小和预试结果而定，一般以 0.65～0.85 的等比级数为宜。 LD50值的计算有多种方法，大体上可以归纳为两大类，其一是死亡率—剂量 反应相关要求为正态分配的，其中概率单位图解法和寇氏法(Karber)较为常用。 另一类是不要求为正态分布的（非正态分布），计算时只查对有关表格即可得到 LD50。如何使用这些方法，应当按照受试化学物的具体情况分别对待。这里简要 介绍改进寇氏法（Karber）氏法，又称平均致死量法。适于此法的基本条件是， 要求每个染毒组实验动物数相同，至少 5 个实验组，死亡率呈正态分布，最低剂 量组死亡率小于 20%，最高剂量组死亡率高于 80%，所选剂量对数差值相等。该 计算公式如下, 首先求出 logLD50及其 95%的可信限，再求出 LD50