4、具体操作步骤: (1)、消化: 精密称取固体样品0.2-2g半固态2-5g液体样品10-20m于凯氏烧瓶(30-50ml)加入无水 K2SO2 g CuSO20.2H2SO420ml。凯氏烧瓶成45倾斜先小火加热待泡沫停止后加大火(330-400, 直到溶液澄清透明为止(34h)。冷却后加水定容(数次冲洗,使溶液全部注入容瓶) (2)、蒸馏: ●将2%硼酸溶液10m放入10oml三角瓶中,加入甲基红混和指示剂5滴,将冷凝管尖端浸入液面下。 将凯氏烧瓶中的内容物移入蒸馏瓶中40% Naohlom加热蒸馏,至硼酸液由酒红色变为蓝绿色时 继续蒸馏5分钟,将冷凝管尖端提出液面,冲洗尖端 ●(3)、滴定: 馏出液用00N标准HCL溶液滴定,直到蓝绿色变为灰紫色。并将滴定结果用空白试验校正。 (4)、计算: 蛋白质(%)=(V1-V2)*N*0.014*6,25∧W*100 V1品滴定时用去001mol标准HCL液 G V2空白滴定时用去00 molAl毫升 N一标准HCL溶液的当量浓度 ●0.014 ImllmolHCL相当于0.014g氮 625N的pro换算系数 W—样品克数 图10-2微量凯氏定氮蒸馏装置⚫ 4、具体操作步骤： ⚫ （1）、消化： ⚫ 精密称取固体样品0.2—2g,半固态2—5g液体样品10—20ml 于凯氏烧瓶（30—50ml）加入无水 K2SO42g,CuSO40.2 H2SO4 20ml 。 凯氏烧瓶成45倾斜先小火加热待泡沫停止后加大火（330—400）， 直到溶液澄清透明为止（3—4h)。冷却后加水定容（数次冲洗，使溶液全部注入容瓶） ⚫ （2）、蒸馏： ⚫ 将2%硼酸溶液10ml放入100ml三角瓶中，加入甲基红混和指示剂5滴，将冷凝管尖端浸入液面下。 将凯氏烧瓶中的内容物移入蒸馏瓶中40%NaOH10ml加热蒸馏，至硼酸液由酒红色变为蓝绿色时， 继续蒸馏5分钟，将冷凝管尖端提出液面，冲洗尖端。 ⚫ （3）、滴定： ⚫ 馏出液用0.01N标准HCL溶液滴定，直到蓝绿色变为灰紫色。并将滴定结果用空白试验校正。 ⚫ （4）、计算： ⚫ 蛋白质（%）=（V1 -V2）*N*0.014*6.25/W *100 ⚫ V1—品滴定时用去0.01mol标准HCL液毫升数 ⚫ V2—空白滴定时用去0.01molHcL毫升数 ⚫ N—标准HCL溶液的当量浓度 ⚫ 0.014—1ml1molHCL相当于0.014g氮 ⚫ 6.25—N的pro换算系数 ⚫ W—样品克数