盐。然该法需中途取出沉淀再溶解,影响了操作的流水性。同时,同上法一样,也会有杂蛋 白与鱼精蛋白一起沉淀而影响纯度。为此采用活性炭之类的吸附剂除去杂质,再用有机溶剂 沉淀得到成品,操作繁杂、成本高。 从现有的资料来看,各国对鱼精蛋白的研究,多以鲑科鱼类为对象,前苏联是用大麻哈 鱼和细鳞大马哈鱼的精巢为原料。而我国由于鲑科鱼类的产量较少,因此从 1958 年开始, 上海和青岛等地的水产科学研究部门,曾多次利用黄色精巢与淡水鱼的鲤鱼精巢提取鱼精蛋 白,并获得成功。八十年代和九十年代浙江水产学院食品科学研究所又从鲐鱼和金枪鱼和淡 水鲢鱼精巢中成功地提取了鱼精蛋白。这样就解决了我国生产鱼精蛋白原料不足的问题。 (二)、原料特征 对于提取鱼精蛋白作用的原料要求较高。要新鲜而成熟,一经排过精液的精巢,即不能 利用。 对原料的保藏要采取妥善的方法。根据实验发现用新鲜原料提取鱼精蛋白的收得率要比 冰冻过的原料高。这是因为在冰冻和解冻过程中部分鱼精蛋白流失的结果。性腺的成熟度对 成品率的影响更大。根据前苏联海洋渔业与海洋研究所发表的资料(见下表)中可看到:成 熟度不大的精巢,其成公差异很大:精巢成熟时,其含氮量增加。 精巢蛋白质的成分很不稳定,它随着性腺的成熟变化很大,精巢成熟时,二氨基酸含量增加, 且其含量的增加主要是由于精氨酸的增加。 在鱼精蛋白中没有酷氨酸(对 Millon 反应呈阴性)、色氨酸、苯丙氨酸、半胱氨酸和甲 硫氨酸。 (三)、提取工艺 1、鱼精蛋白矿酸盐(以鱼精蛋白硫酸盐为例) 鱼精蛋白通常主要以 DNA-蛋白质的形式 聚集于鱼类精子中,但这种核蛋白的结合链并不牢固,能被硫酸等强酸所解离而释出易溶于 水,不溶于乙醇、乙醚等有机溶剂的鱼精蛋白硫酸盐,其提取工艺如下: 原料鱼精 → 绞碎 → 过滤 → 醋酸酸化 → 沉淀 → 压滤 → 酒精洗涤沉淀→ 过滤→ 潮固体品 → 硫酸抽提 → 过滤 → 加硅藻土过滤→ 酒精沉淀 → 离心分离→ 粗鱼精蛋 白硫酸盐 → 水溶解 → 过滤 → NaOH 碱化 → 沉淀→ 加温→ 过滤 → 滤液静置→ 油状沉淀 → 硫酸溶解 → 过滤 → 乙醇处理 → 沉淀 → 丙酮、乙醚洗涤 → 真空干燥 → 鱼精蛋白破酸盐成品 → 用注射水溶解 → 配料 →无菌过滤 → 灌封 → 鱼精蛋白硫酸盐 注射液。 上述生产工艺要点: (1)原料处理 将新鲜成熟的鱼精绞碎后,加入一定量水搅拌 1h 后,用尼龙纱布滤除结缔 组织等。再加冰醋酸在乳白色滤液中,使滤液呈酸性,鱼精蛋白沉淀,然后压滤;加入药用 酒精洗涤沉淀物,过滤即得潮固体品。 (2)硫酸提取 将潮固体品加一定量 10%H2SO4 至糊状物的酸浓度达 4%-5%,搅拌 2h, 使鱼精蛋白与核酸分离。过滤去滤渣,再加少量藻土,用纸浆过滤得稍微混浊的鱼精蛋白质 硫酸盐溶液,然后加酒精至溶液中含醇量达 70%-72%,置 0℃下 8-12h,离心得粗制鱼精蛋 白硫酸盐沉淀物。 (3)精制 将上述粗制品加入无热源馏水加热溶解,加少量硅藻土趁热过滤,滤液再在水 浴中加热至 80℃,滴加 1N NaOH 溶液至 pH9.0 左右,0.5h 后趁热过滤,滤液在 0℃下静 置 24h,有油膏状物质沉集底部,倾去上清液,然后再用 3 倍药用酒精,在 0℃下静置 8-12h, 离心所得沉淀,用药用丙酮洗涤 3-4 次,再用乙醚洗 1 次,最后真空干燥,得鱼精蛋白硫酸 盐成品。若再配料(加入氯化钠及苯酚和适量 1N 硫酸)、灌封等加工,则可生产出注射剂。 2、离子交换法 将经过处理的强碱性苯乙烯离子树脂装柱。 鱼精原料 → 洗涤、沥干 → 捣碎 → 加硫酸搅拌 → 离心取上清液 → 上柱分离 → 洗脱 →减压干燥或冷冻干燥 → 鱼精蛋白硫酸盐成品。 3、二段盐析法 浙江水产学院从鱼精蛋白和杂蛋白的性质差异出发,采用溶解性显著差别 的盐析法除去蛋白,所得制品纯度较高,而且得率也高,成本低,生产周期短,此工艺称为 新的二段盐析法。 硫酸鱼精蛋白质粉末,易溶于水,不溶于乙醇或乙醚等有机溶剂。 注射用的质量标准: (1)鱼精蛋白硫酸盐的生理氯化钠注射液,每 ml 内含:盐。然该法需中途取出沉淀再溶解,影响了操作的流水性。同时,同上法一样,也会有杂蛋 白与鱼精蛋白一起沉淀而影响纯度。为此采用活性炭之类的吸附剂除去杂质,再用有机溶剂 沉淀得到成品,操作繁杂、成本高。 从现有的资料来看,各国对鱼精蛋白的研究,多以鲑科鱼类为对象,前苏联是用大麻哈 鱼和细鳞大马哈鱼的精巢为原料。而我国由于鲑科鱼类的产量较少,因此从 1958 年开始, 上海和青岛等地的水产科学研究部门,曾多次利用黄色精巢与淡水鱼的鲤鱼精巢提取鱼精蛋 白,并获得成功。八十年代和九十年代浙江水产学院食品科学研究所又从鲐鱼和金枪鱼和淡 水鲢鱼精巢中成功地提取了鱼精蛋白。这样就解决了我国生产鱼精蛋白原料不足的问题。 (二)、原料特征 对于提取鱼精蛋白作用的原料要求较高。要新鲜而成熟,一经排过精液的精巢,即不能 利用。 对原料的保藏要采取妥善的方法。根据实验发现用新鲜原料提取鱼精蛋白的收得率要比 冰冻过的原料高。这是因为在冰冻和解冻过程中部分鱼精蛋白流失的结果。性腺的成熟度对 成品率的影响更大。根据前苏联海洋渔业与海洋研究所发表的资料(见下表)中可看到:成 熟度不大的精巢,其成公差异很大:精巢成熟时,其含氮量增加。 精巢蛋白质的成分很不稳定,它随着性腺的成熟变化很大,精巢成熟时,二氨基酸含量增加, 且其含量的增加主要是由于精氨酸的增加。 在鱼精蛋白中没有酷氨酸(对 Millon 反应呈阴性)、色氨酸、苯丙氨酸、半胱氨酸和甲 硫氨酸。 (三)、提取工艺 1、鱼精蛋白矿酸盐(以鱼精蛋白硫酸盐为例) 鱼精蛋白通常主要以 DNA-蛋白质的形式 聚集于鱼类精子中,但这种核蛋白的结合链并不牢固,能被硫酸等强酸所解离而释出易溶于 水,不溶于乙醇、乙醚等有机溶剂的鱼精蛋白硫酸盐,其提取工艺如下: 原料鱼精 → 绞碎 → 过滤 → 醋酸酸化 → 沉淀 → 压滤 → 酒精洗涤沉淀→ 过滤→ 潮固体品 → 硫酸抽提 → 过滤 → 加硅藻土过滤→ 酒精沉淀 → 离心分离→ 粗鱼精蛋 白硫酸盐 → 水溶解 → 过滤 → NaOH 碱化 → 沉淀→ 加温→ 过滤 → 滤液静置→ 油状沉淀 → 硫酸溶解 → 过滤 → 乙醇处理 → 沉淀 → 丙酮、乙醚洗涤 → 真空干燥 → 鱼精蛋白破酸盐成品 → 用注射水溶解 → 配料 →无菌过滤 → 灌封 → 鱼精蛋白硫酸盐 注射液。 上述生产工艺要点: (1)原料处理 将新鲜成熟的鱼精绞碎后,加入一定量水搅拌 1h 后,用尼龙纱布滤除结缔 组织等。再加冰醋酸在乳白色滤液中,使滤液呈酸性,鱼精蛋白沉淀,然后压滤;加入药用 酒精洗涤沉淀物,过滤即得潮固体品。 (2)硫酸提取 将潮固体品加一定量 10%H2SO4 至糊状物的酸浓度达 4%-5%,搅拌 2h, 使鱼精蛋白与核酸分离。过滤去滤渣,再加少量藻土,用纸浆过滤得稍微混浊的鱼精蛋白质 硫酸盐溶液,然后加酒精至溶液中含醇量达 70%-72%,置 0℃下 8-12h,离心得粗制鱼精蛋 白硫酸盐沉淀物。 (3)精制 将上述粗制品加入无热源馏水加热溶解,加少量硅藻土趁热过滤,滤液再在水 浴中加热至 80℃,滴加 1N NaOH 溶液至 pH9.0 左右,0.5h 后趁热过滤,滤液在 0℃下静 置 24h,有油膏状物质沉集底部,倾去上清液,然后再用 3 倍药用酒精,在 0℃下静置 8-12h, 离心所得沉淀,用药用丙酮洗涤 3-4 次,再用乙醚洗 1 次,最后真空干燥,得鱼精蛋白硫酸 盐成品。若再配料(加入氯化钠及苯酚和适量 1N 硫酸)、灌封等加工,则可生产出注射剂。 2、离子交换法 将经过处理的强碱性苯乙烯离子树脂装柱。 鱼精原料 → 洗涤、沥干 → 捣碎 → 加硫酸搅拌 → 离心取上清液 → 上柱分离 → 洗脱 →减压干燥或冷冻干燥 → 鱼精蛋白硫酸盐成品。 3、二段盐析法 浙江水产学院从鱼精蛋白和杂蛋白的性质差异出发,采用溶解性显著差别 的盐析法除去蛋白,所得制品纯度较高,而且得率也高,成本低,生产周期短,此工艺称为 新的二段盐析法。 硫酸鱼精蛋白质粉末,易溶于水,不溶于乙醇或乙醚等有机溶剂。 注射用的质量标准: (1)鱼精蛋白硫酸盐的生理氯化钠注射液,每 ml 内含: