将1ml细菌培养物倒入1.5ml离心管,1200rpm,1min,弃上清,收集细菌 将1ml细菌培养物倒入同一个1.5ml离心管,12000rpm,lmin,收集细菌 弃上清,沥干,注意细菌沉淀别倒掉了! 加250μ I Buffer s1,吹打混匀(也可 Vortex)以充分悬浮细菌 请保持同步!加250μ I Buffer s2,上下颠倒,温和混匀46次使菌体裂解 离心机配平 避免剧烈摇晃,此步骤不宜超过5mn 加350μ I Buffer s3,上下颠倒,温和混匀6-8次,12000g离心1min 避免剧烈摇晃 吸取上清至已置于2ml离心管的制备管(即;柱子)中,12000g离心lmin,弃滤液 同上,在制备管中加500 ul Buffer w1,1200g离心1min,弃滤液 在制备管中加700 ul Buffer W2,1200g离心lmin,弃 滤液,重复以 Buffer w洗涤(离心)一次,再空离心1次 将制备管移入新的1.5ml离心管,在膜中央加60μ Eluent或去离子水, 室温静置Imin,12000g离心lmin,所收集的液体即为质粒DNA。 Luen液65度温育可提高洗脱效率18 将1 ml 细菌培养物倒入1.5ml 离心管，12000rpm，1min，弃上清，收集细菌 加250 μl Buffer S1，吹打混匀（也可Vortex）以充分悬浮细菌 加250 μl Buffer S2，上下颠倒，温和混匀4~6次使菌体裂解 加350 μl Buffer S3，上下颠倒，温和混匀6~8次，12000g 离心10min 吸取上清至已置于 2ml 离心管的制备管（即：柱子）中，12000g离心1min，弃滤液 同上，在制备管中加500 μl Buffer W1， 12000g离心1min ，弃滤液 在制备管中加700 μl Buffer W2， 12000g 离心1min ，弃 滤液，重复以Buffer W2洗涤（离心）一次，再空离心1次 将制备管移入新的1.5ml离心管，在膜中央加60 μl Eluent或去离子水， 室温静置1min， 12000g离心1min，所收集的液体即为质粒DNA。 避免剧烈摇晃，此步骤不宜超过5min 避免剧烈摇晃 Eluent液65度温育可提高洗脱效率 请保持同步！ 离心机配平 弃上清，沥干，注意细菌沉淀别倒掉了！ 将1 ml 细菌培养物倒入同一个1.5ml 离心管，12000rpm，1min，收集细菌