CH.OH CHOH o CIL.OH 11 F(S0:I为 (亚所酸品红》 敦红色物) 图1-3PAS反应原理示意图 2,脂类脂类物质包括脂肪和类脂。标本用甲醛固定，冷冻切片，脂类保存较好。多用苏 丹染料、油红0、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色，使脂质呈色。也可用四氧化饿(OsO4)染 色，脂肪酸或胆碱可使0s04还原为0s02而呈黑色， 3.酶细胞内的酶种类甚多，有氧化还原酶、水解酶、合成酶、转移酶等几类，目前已有 100多种酶组织化学染色法。酶组化反应的基本原理是利用酶对其相应底物的水解、氧化等作 用，然后再使底物的反应产物与某种捕获剂发生反应，形成沉淀或有色的最终产物，借此检测 该酶在组织切片或细胞内的分布及活性强弱。如细胞的磷酸酶是一种重要的水解酶，碱性磷酸 酶(ALP)和酸性磷酸酶(ACP)在合适的pH条件下可水解有机磷酸脂。小肠上皮细胞表面的 纹状缘和肾近曲小管表面的刷状缘处，微绒毛含有丰富的ALP,与物质的吸收和转运功能相 关；许多细胞的溶酶体内则含大量ACP,参与细胞内物质代谢。这两种酶均可以B-甘油磷酸 钠为底物，底物被水解产生磷酸根，再以Ca2+、C02+(显示ALP)或Pb2+(显示ACP)捕获磷酸 根，最后用硫化铵处理，即形成硫化钴或硫化铅黑色最终产物，出现在组织切片中该酶存在的 部位。因此，酶组化染色不是酶本身的直接显色，而是酶作用底物的化学反应产物显色的。 4.核酸显示DNA的传统方法是Feulgen反应，切片先用稀盐酸处理，使DNA分子中脱氧 核糖与嘌呤之间的连接键打开，形成醛基，再与Schiff试剂作用，原理同PAS反应，使细胞核 DNA显紫红色。还可用甲基绿-焦宁染色法同时显示DNA和RNA,这两种染料都是碱性，甲 基绿使细胞核内的DNA呈蓝绿色，焦宁使细胞质和核仁内的RNA呈红色。图1－3 PAS反应原理示意图 2．脂类脂类物质包括脂肪和类脂。标本用甲醛固定，冷冻切片，脂类保存较好。多用苏 丹染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色，使脂质呈色。也可用四氧化锇（OSO4）染 色，脂肪酸或胆碱可使OSO4还原为OSO2而呈黑色。 3．酶细胞内的酶种类甚多，有氧化还原酶、水解酶、合成酶、转移酶等几类，目前已有 100多种酶组织化学染色法。酶组化反应的基本原理是利用酶对其相应底物的水解、氧化等作 用，然后再使底物的反应产物与某种捕获剂发生反应，形成沉淀或有色的最终产物，借此检测 该酶在组织切片或细胞内的分布及活性强弱。如细胞的磷酸酶是一种重要的水解酶，碱性磷酸 酶（ALP）和酸性磷酸酶（ACP）在合适的pH条件下可水解有机磷酸脂。小肠上皮细胞表面的 纹状缘和肾近曲小管表面的刷状缘处，微绒毛含有丰富的ALP，与物质的吸收和转运功能相 关；许多细胞的溶酶体内则含大量ACP，参与细胞内物质代谢。这两种酶均可以β－甘油磷酸 钠为底物，底物被水解产生磷酸根，再以Ca 2+、Co 2+ (显示ALP)或Pb 2+（显示ACP）捕获磷酸 根，最后用硫化铵处理，即形成硫化钴或硫化铅黑色最终产物，出现在组织切片中该酶存在的 部位。因此，酶组化染色不是酶本身的直接显色，而是酶作用底物的化学反应产物显色的。 4．核酸 显示DNA的传统方法是Feulgen反应，切片先用稀盐酸处理，使DNA分子中脱氧 核糖与嘌呤之间的连接键打开，形成醛基，再与Schiff 试剂作用，原理同PAS反应，使细胞核 DNA显紫红色。还可用甲基绿－焦宁染色法同时显示DNA和RNA，这两种染料都是碱性，甲 基绿使细胞核内的DNA呈蓝绿色，焦宁使细胞质和核仁内的RNA呈红色