采用高压匀浆器是大规模破碎细胞的常用方法，利用高压迫使细胞悬浮液通过 针形阀，由于突然减压和高速冲击撞击环造成细胞破裂 各种菌体一次通过高压匀浆器的破碎率 菌体 压力（Mpa） 破碎率（%） 面包酵母 啤酒酵母 大肠杆菌 解肢假丝酵母 53 55 53 55 62 61 67 43 （3）X-press 法 一种改进的高压方法是将浓缩的菌体悬浮液冷却至-25˚C 至-30 ˚C 形成冰晶体， 利用 500 MPa 以上的高压冲击，冷冻细胞从高压阀小孔中挤出。细胞破碎是由于冰 晶体的磨损，包埋在冰中的微生物的变形所引起的。 该法的优点是适用的范围广，破碎率高，细胞碎片的粉碎程度低以及活性的保 留率高，该法对冷冻—融解敏感的生化物质不适用。 （4）超声波法 细胞的破碎是由于超声波的空穴作用，从而产生一个极为强烈的冲击波压力， 由它引起的粘滞性旋涡在介质中的悬浮细胞上造成了剪切应力，促使细胞内液体发 生流动，从而使细胞破碎。 对于不同菌种的发酵液、超声波处理的效果不同，杆菌比球菌易破碎、革兰氏 阴性菌细胞比革兰氏阳性菌细胞容易破碎，对酵母菌的效果级差。 该法不适于大规模操作，因为放大后，要输入很高的能量来提供必要的冷却， 这是困难的。 （5）酶解法 利用酶反应，分解破坏细胞壁上特殊的键，从而达到破壁的目的。 优点：专一性强，发生酶解的条件温和。 缺点：酶水解费用较贵，一般只适用于小规模的实验室研究。 溶菌酶是应用最多的酶，它能专一地分解细胞壁上糖蛋白分子的 α-1，4 糖苷键， 使脂多糖解离，经溶菌酶处理后的细胞移至低渗溶液中使细胞破裂。 （6）自溶作用 是酶解的另一种方法，所需溶胞的酶是由微生物本身产生的。影响自溶过程的 因素有温度、时间、pH 缓冲液浓度、细胞代谢途径等。自溶法在一定程度上能用于 工业规模，但是，对不稳定的微生物容易引起所需蛋白质的变性，自溶后的细胞培 养液过滤速度也会降低。 （7）渗透压冲击 是较温和的一种破碎方法，将细胞放在高渗透压的介质中(如一定浓度的甘油或 蔗糖溶液)，入达到平衡后，介质被突然稀释，或者将细胞转入水或缓冲液中，由于 渗透压的突然变化，水迅速进入细胞内，引起细胞壁的破裂。 渗透压冲击的方法仅对细胞壁较脆弱的菌，或者细胞壁预先用酶处理，或合成 受抑制而强度减弱时才是合适的。 （8）冻结-融化法