将细胞放在低温下突然冷冻和室温下融化，反复多次而达到破壁作用。由于冷 冻，一方面能使细胞膜的硫水键结构破裂，从而增加了细胞的亲水性能，另一方面 胞内水结晶，使细胞内外溶液浓度变化，引起细胞突然膨胀而破裂。对于细胞壁较 脆弱的菌体，可采用此法。但通常破碎率很低即使反复循环多次也不能提高收率。 另外，还可能引起对冻融敏感的某些蛋白质的变性。 （9）干燥法 可采用空气干燥，真空干燥，喷雾干燥和冷冻干燥等。空气干燥主要适用于酵 母菌。真空干燥适用于细菌的干燥。冷冻干燥适用于较不稳定的生化物质。干燥法 条件变化较剧烈，容易引起蛋白质或其它组织变性。 （10）化学法 用酸碱及表面活性剂处理，可以使蛋白质水解，细胞溶解或使某些组分从细胞 内渗漏出来。某些脂溶性溶剂也能作为化学处理的方法，如丁醇、丙酮、氯仿及尿 素等。但是，这些试剂容易引起生化物质破坏，还会带来分离和回收化学物质的问 题。 2，破碎方法的选择 选择合适的破碎方法需要考虑下列因素： （1）细胞的数量； （2）所需要的产物对破碎条件(温度、化学试剂、酶等)的敏感性； （3）要达到的破碎程度及破碎所必要的速度， （4）尽可能采用最温和的方法； （5）具有大规模应用潜力的生化产品应选择适合于放大的破碎技术