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c.理化+生物测定法:如虾的蜕皮激素的分离,用理化法不能用(含量极低),用丽 蝇的生物测定法结合理化法,从 1000Kg 得 2mg 蜕皮激素。又如,蚕的蚕醇 用 气相色谱法+蚕蛾兴奋反应法。 2.制备物物理化学性质稳定性预备试验 A.溶解性 在水或各种稀酸的溶解性。 弱酸性溶剂(乙醇,甲醇,丙酮)的溶解性。 各种非极性溶剂中(氯仿及各种烃类)的溶解性。 B.溶液的稳定性 pH 稳定范围,温度效应,各种缓冲液的影 响,有机溶剂的影响。 C.固态时稳定性 温度,水分的影响,低压冻干效应 D.物理性质 通过不同大小孔径膜的能力,在固体上的吸附作 用,在电场中每一 pH 的迁移率,在超离心力场中 的沉降行为。 E.化学性质 膜蛋白酶及其他蛋白酶,DNase,Rnase,糖类 水解酶等作用 的稳定性,在温和条件下乙酰化作用 的稳定性,对亚硝酸作用的稳定性,酯化作用的稳 定性。 3.材料处理及抽提方法的选择. 处理:机械法,物理化学(反复冻融发,骤热骤冷法,超声波 处理法等)及生物处理法(自溶法,酶解法,表面活性 处理法) 抽提:水,酸碱盐,表面活性剂,有机溶剂。 4.分离纯化方法的摸索。 分离方法: 色谱法 逆流分配 电泳法 沉降法 透析 溶解度(盐析,有机溶剂抽提) 5.获取制备物以后,均一性的测定。 溶解度法 电泳均一性测定法 高速离心沉降法c.理化+生物测定法:如虾的蜕皮激素的分离,用理化法不能用(含量极低),用丽 蝇的生物测定法结合理化法,从 1000Kg 得 2mg 蜕皮激素。又如,蚕的蚕醇 用 气相色谱法+蚕蛾兴奋反应法。 2.制备物物理化学性质稳定性预备试验 A.溶解性 在水或各种稀酸的溶解性。 弱酸性溶剂(乙醇,甲醇,丙酮)的溶解性。 各种非极性溶剂中(氯仿及各种烃类)的溶解性。 B.溶液的稳定性 pH 稳定范围,温度效应,各种缓冲液的影 响,有机溶剂的影响。 C.固态时稳定性 温度,水分的影响,低压冻干效应 D.物理性质 通过不同大小孔径膜的能力,在固体上的吸附作 用,在电场中每一 pH 的迁移率,在超离心力场中 的沉降行为。 E.化学性质 膜蛋白酶及其他蛋白酶,DNase,Rnase,糖类 水解酶等作用 的稳定性,在温和条件下乙酰化作用 的稳定性,对亚硝酸作用的稳定性,酯化作用的稳 定性。 3.材料处理及抽提方法的选择. 处理:机械法,物理化学(反复冻融发,骤热骤冷法,超声波 处理法等)及生物处理法(自溶法,酶解法,表面活性 处理法) 抽提:水,酸碱盐,表面活性剂,有机溶剂。 4.分离纯化方法的摸索。 分离方法: 色谱法 逆流分配 电泳法 沉降法 透析 溶解度(盐析,有机溶剂抽提) 5.获取制备物以后,均一性的测定。 溶解度法 电泳均一性测定法 高速离心沉降法
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