的含量和分布不同,也与染色体上深浅带的形成有关。A—T碱基对较多的区域, 易与吉姆萨染料结合而染成深色区带;而G-C碱基对较多的区域则相反,染成 浅染区带。总之,目前说法较多,主要概括为三种观点,即显带是由于①DNA 的作用:②蛋白质的作用;③DNA、染料和蛋白质三者之间相互作用的结果。这 些都有待于进一步硏究探讨。人染色体标本经胰蛋白酶、NaOH、柠檬酸盐或尿 素等试剂处理后,再用 Giemsa染色,可使每条染色体上显示出深浅交替的横纹, 这就是染色体的G带 G显带制备方法简便易行,标本可长期保存,带纹清晰,成本低廉,制备周 期短,普通光学显微镜即可观察。故已成为研究分析染色体的主要常规方法之一。 、实验用品和材料 (一)器械 普通光学显微镜、37℃恒温水浴箱、立式染色缸、刻度吸管、橡皮吸头、pH 试纸。 (二)试剂 2.5%胰蛋白酶原液、0.25%的胰蛋白酶工作液、生理盐水、 Giemsa原液 Giemsa工作液、1molL磷酸缓冲液(pH40~4.5)。 、基本步骤(胰蛋白酶法) 1.将常规制备的人染色体玻片标本(未染色的白片)置于70℃烤箱中处理 2h,然后转入37℃培养箱中备用,一般在第3~7天进行显带。 2.取0.25%胰蛋白酶溶液5m,倒入染色缸中,加入45m生理盐水,用1 mol/L HCl和1 mol/L Naoh及酚红调节胰蛋白酶溶液pH68~7.2。 3.将配好的胰蛋白酶工作液放入37℃恒温水浴箱中预温 4.将玻片标本浸入胰蛋白酶液中,不断摆动使胰蛋白酶的作用均匀,处理 1~2min(精确的时间需自行摸索)。 5.立即取出玻片,放入生理盐水中漂洗2次 6.将标本浸入37℃预温的 Giemsa工作液( Giemsa原液和pH6.8的磷酸缓 冲液比例为19)中染色10min左右。 7.自来水冲洗(用细水小心冲洗),空气晾干。5 的含量和分布不同，也与染色体上深浅带的形成有关。A—T 碱基对较多的区域， 易与吉姆萨染料结合而染成深色区带；而 G—C 碱基对较多的区域则相反，染成 浅染区带。总之，目前说法较多，主要概括为三种观点，即显带是由于:①DNA 的作用；②蛋白质的作用；③DNA、染料和蛋白质三者之间相互作用的结果。这 些都有待于进一步研究探讨。人染色体标本经胰蛋白酶、NaOH、柠檬酸盐或尿 素等试剂处理后，再用 Giemsa 染色，可使每条染色体上显示出深浅交替的横纹， 这就是染色体的 G 带。 G 显带制备方法简便易行，标本可长期保存，带纹清晰，成本低廉，制备周 期短，普通光学显微镜即可观察。故已成为研究分析染色体的主要常规方法之一。 二、实验用品和材料 （一）器械 普通光学显微镜、37℃恒温水浴箱、立式染色缸、刻度吸管、橡皮吸头、pH 试纸。 （二）试剂 2.5%胰蛋白酶原液、0.25%的胰蛋白酶工作液、生理盐水、Giemsa 原液、 Giemsa 工作液、1 mol/L 磷酸缓冲液（pH 4.0～4.5）。 三、基本步骤（胰蛋白酶法） 1．将常规制备的人染色体玻片标本（未染色的白片）置于 70℃烤箱中处理 2 h，然后转入 37℃培养箱中备用，一般在第 3～7 天进行显带。 2．取 0.25%胰蛋白酶溶液 5 ml，倒入染色缸中，加入 45 ml 生理盐水，用 1 mol/L HCl 和 1 mol/L NaOH 及酚红调节胰蛋白酶溶液 pH 6.8～7.2。 3．将配好的胰蛋白酶工作液放入 37℃恒温水浴箱中预温。 4．将玻片标本浸入胰蛋白酶液中，不断摆动使胰蛋白酶的作用均匀，处理 1～2 min（精确的时间需自行摸索）。 5．立即取出玻片，放入生理盐水中漂洗 2 次。 6．将标本浸入 37℃预温的 Giemsa 工作液（Giemsa 原液和 pH 6.8 的磷酸缓 冲液比例为 1:9）中染色 10 min 左右。 7．自来水冲洗（用细水小心冲洗），空气晾干