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2.幼苗鉴定法 六、种子纯度的电泳鉴定 (一)应用电泳鉴定品种的理论基础 1.电泳基础 电泳是指带电颗粒在电场作用下向与其电性相反方向的电极移 动的现象。由于蛋白质是由许多氨基酸组成,除肽链的两端有自由的 氨基和羧基外,在侧链上还有很多可解离的基团,如氨基、羧基、酚 基、巯基、咪唑基、胍基等,在一定条件下,这些基团都能解离成为 带电基团。在不同的p条件下,可分别解离成正负离子,因而带不 同的电荷。 般地,氨基酸在酸性溶液中带正电荷,在碱性深液中带负电荷。 在某一p时蛋白质所带的正负电荷相等,在电场中既不向正极移动, 也不向负极移动,这时溶液的p值即为该蛋白质的等电点。当溶液 的pH值小于pI时,蛋白质带正电荷,反之带负电荷。由于蛋白质带 有电荷,因此在电场中能泳动,泳动速度主要取决于所带电荷的数量 分子的大小及形状和电场特征。 (1)电泳基本设备 温控设备(冰箱、保温箱)和电泳设备(电泳仪和电泳槽) (2)电泳缓冲系统 指由处理或溶解样品、配制或浸泡支持物及电泳时电极槽所用缓 冲液构成的缓冲体系。缓冲系统在电泳过程中有两个主要作用:一是 缓冲电泳过程中支持物上和电泳槽内的改变。电泳过程中阳极 瑞形成酸性离子,阴性一端形成碱性离子,溶液的改变程度与电 泳持续时间、所用的电压和产生的电流呈正相关。二是缓冲液形成正 负极与支持介质之间的离子通道,起传导电流的作用。 2.应用电泳鉴定品种的理论基础 在品种鉴定中,个体或群体间蛋白质成分的差异,反映基因表达 的根本差异。由于基因是与遗传特征相联系的,所以蛋白质标志能用
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