核酸杂交技术 徐艺文16307130289 技术原理 核酸杂交技术原理是核酸变性和复性理论。即双链的核酸分子在某些理化因 素作用下双链解开,而在条件恢复后又可依碱基配对规律形成双链结构。 NOIN NO 0000 DNA double helices denaturation to renaturation restore (nucleotide pairs (nucleotide pairs re-formed) broken) 变性 退火 复性 把经酶切的、电泳分离的、经碱变性后生成单链分子的待检测核酸片段转印 到特定的膜上,用已知特定序列的标记探针与之杂交,以检验该核酸片段是否与 根据检测样品的不同又被分为DNA印迹杂交( Southern blot hybridization)和 RNA印迹杂交( Northern blot hybridization)。 核酸分子杂交的操作程序如下图所示: 制备待测核酸样品 制备核酸探针 分离、变性、转移、固化DNA片段 标记核酸探针 预杂交 加入标记核酸探针 杂交 漂洗去除未参与杂交的标记探针 检测杂交信号核酸杂交技术 徐艺文 16307130289 一、技术原理 核酸杂交技术原理是核酸变性和复性理论。即双链的核酸分子在某些理化因 素作用下双链解开，而在条件恢复后又可依碱基配对规律形成双链结构。 把经酶切的、电泳分离的、经碱变性后生成单链分子的待检测核酸片段转印 到特定的膜上，用已知特定序列的标记探针与之杂交，以检验该核酸片段是否与 已知的探针有同源序列。杂交通常在一支持膜上进行，因此又称为核酸印迹杂交。 根据检测样品的不同又被分为 DNA 印迹杂交（Southern blot hybridization ）和 RNA 印迹杂交（Northern blot hybridization）。 核酸分子杂交的操作程序如下图所示： 制备待测核酸样品 分离、变性、转移、固化 DNA 片段 预杂交 制备核酸探针 标记核酸探针 加入标记核酸探针 杂交 漂洗去除未参与杂交的标记探针 检测杂交信号