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al247 sp297 eu244 phor(substrate) val295. 0 Heme 点 图8.5酶-底物复合物的结构。(左边)细胞色素P450与底物樟脑结合的结构图。(右边)在 活性位点,底物周围有酶蛋白的氨基酸残基,还有一个血红素辅基。 3.很多酶与底物形成复合物时,光谱特征发生改变。如果酶的辅基有颜色,这种改变就非 常明显。含有颜色的辅基(磷酸吡哆醛PLP)的细菌色氨酸合成酶就是一个很好的例子。 该酶能够用L-Sr和吲哚衍生物合成L-色氨酸。L-丝氨酸加合到酶上能显著增加PLP 的荧光强度(图8.6)。第二个基团吲引哚的加入又将荧光水平降低到比原始蛋白还低的程 度。因此荧光光谱揭示酶-丝氨酸复合物和酶-丝氨酸吲引哚复合物的存在。其他光谱性质, 包括核磁共振和电子旋转共振也能提供酶-底物复合物的大量信息。 +Serine Enzyme alone +Serine and indole 450 500 550 Wavelength(nm) btm 国86酶-底物复合物的形成有光谱特征的显著变化。丝氨酸和吲哚底物的加入会改变色氨 酸合成酶磷酸吡哆醛的荧光强度。 酶活性位,点的一些共同特征 1.多肽链不同部分的基团构成活性位点,处于蛋白质三维结构的缝隙或洞穴。实际上,序列 相距很远的氨基酸残基可能比序列相邻氨基酸相互作用更强烈。溶菌酶能够降解细菌细 胞壁,由129个氨基酸残基构成。其活性位点的氨基酸残基分别是35,52,62,101,和 108(图8.7)。图 8.5 酶-底物复合物的结构。(左边)细胞色素 P450 与底物樟脑结合的结构图。(右边)在 活性位点,底物周围有酶蛋白的氨基酸残基,还有一个血红素辅基。 3. 很多酶与底物形成复合物时,光谱特征发生改变。如果酶的辅基有颜色,这种改变就非 常明显。含有颜色的辅基(磷酸吡哆醛 PLP)的细菌色氨酸合成酶就是一个很好的例子。 该酶能够用 L-Ser 和吲哚衍生物合成 L-色氨酸。L-丝氨酸加合到酶上能显著增加 PLP 的荧光强度(图 8.6)。第二个基团吲哚的加入又将荧光水平降低到比原始蛋白还低的程 度。因此荧光光谱揭示酶-丝氨酸复合物和酶-丝氨酸-吲哚复合物的存在。其他光谱性质, 包括核磁共振和电子旋转共振也能提供酶-底物复合物的大量信息。 图 8.6 酶-底物复合物的形成有光谱特征的显著变化。丝氨酸和吲哚底物的加入会改变色氨 酸合成酶磷酸吡哆醛的荧光强度。 酶活性位点的一些共同特征 1. 多肽链不同部分的基团构成活性位点,处于蛋白质三维结构的缝隙或洞穴。实际上,序列 相距很远的氨基酸残基可能比序列相邻氨基酸相互作用更强烈。溶菌酶能够降解细菌细 胞壁,由 129 个氨基酸残基构成。其活性位点的氨基酸残基分别是 35,52,62,101,和 108(图 8.7)
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