实验六 [目的要求] 1.了解高压蒸汽灭菌的基本原理及应用范围。2.学习高压蒸汽灭菌的操作方法 [实验原理]高压蒸汽灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。从而使 沸点增高,得到高于100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。 [教学内容]高压蒸汽灭菌 实验七 [目的要求]了解紫外线灭菌的原理和方法 [实验原理] 紫外线灭菌是用紫外线灯进行的。波长为200-300mm的紫外线都有杀菌能力,其中以260nm的杀菌力最强。在波长 定的条件下,紫外线的杀菌效率与强度和时间的乘积成正比。紫外线杀菌机制主要是因为它诱导了胸腺嘧啶二聚体的形成和DNA链的交 联,从而抑制了DNA的复制。另一方面,由于辐射能使空气中的氧电离成[O],再使02氧化生成自臭氧(03)或使水(H20)氧化生成过氧化 氢(H202)。03和H202均有杀菌作用 [教学内容] 紫外线灭菌 实验八 [目的要求]了解过滤除菌的原理:掌握微孔滤膜过滤除菌的方法 [实验原理]过滤除菌是通过机械作用滤去液体或气体中细菌的方法。根据不同的需要选用不同的滤器和滤板材料。此法除菌的最大优 点是可以不破坏溶液中各种物质的化学成分,但由于滤量有限,所以一般只适用于实验室中小量溶液的过滤除菌。 [教学内容]微孔滤膜过滤除菌 实验九 [目的要求]掌握倒平板的方法和几种常用的分离纯化微生物的基本操作技术 [实验原理]从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。常用的方法有:1).简易单细胞 挑取法;2).平板分离法。 土壤是微生物生活的大本营,它所含微生物无论是数量还是种类都是极其丰富的。因此土壤是微生物多样性的重要场所,是发据微生物资 源的重要基地,可以从中分离、纯化得到许多有价值的菌株 教学内容]微生物的分离与纯化 实验十 [目的要求] 1.了解不同的微生物在斜面上、半固体培养基和液体培养基中的生长特征 2.进一步熟练和掌握微生物无菌操作技术 [实验原理]微生物的培养特征是指微生物在固体培养基上、半固体和液体培养基中生长后所表现出的群体形态特征。不同的微生物有 其固有的培养特征,这些特征一般用固体、半固体和液体培养基来进行检测 检测微生物的培养特征时,接种和培养过程中必须保证不被其他微生物所污染,因此,除工作环境要求尽可能地避免或减少杂菌污染外, 熟练地掌握各种无菌操作接种技术是很重要。 [教学内容] 微生物的培养特征 [目的要求]1.学习微生物涂片、染色的基本技术,掌握细菌的简单染色法。2.初步认识细菌的形态特征。3.巩固显微镜(油镜)的使用方 法和无菌操作技术 [实验原理]简单染色法是利用单一染料对细菌进行染色的一种方法。此法操作简便,适用于菌体一般形状和细菌排列的观察。常用碱 性染料进行简单染色,这是因为:在中性、碱性或弱酸性溶液中,细菌细胞通常带负电荷,而碱性染料在电离时,其分子的染色部分带正 电荷(酸性染料电离时,其分子的染色部分带正电荷),因此碱性染料的染色部分很容易与细菌结合使细菌着。染色后的细菌细胞与背景形 成鲜明的对比,在显微镜下更易于识别。常用作简单染色的染料有:美蓝、结晶紫、碱性复红等 当细菌分解糖类产酸使培养基pH下降时,细菌所带正电荷增加,此时可用伊红、酸性复红或刚果红等酸性染料染色。 [教学内容]细菌的简单染色法 实验十二 [目的要求] 学习并初步掌握革兰氏染色法。2.了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性。实验六 [目的要求] 1.了解高压蒸汽灭菌的基本原理及应用范围。2.学习高压蒸汽灭菌的操作方法。 [实验原理] 高压蒸汽灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。从而使 沸点增高，得到高于 100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。 [教学内容] 高压蒸汽灭菌 实验七 [目的要求] 了解紫外线灭菌的原理和方法 [实验原理] 紫外线灭菌是用紫外线灯进行的。波长为 200-300nm 的紫外线都有杀菌能力，其中以 260nm 的杀菌力最强。在波长 一定的条件下，紫外线的杀菌效率与强度和时间的乘积成正比。紫外线杀菌机制主要是因为它诱导了胸腺嘧啶二聚体的形成和 DNA 链的交 联，从而抑制了 DNA 的复制。另一方面，由于辐射能使空气中的氧电离成［O］，再使 O2 氧化生成自臭氧(O3)或使水(H2O)氧化生成过氧化 氢(H2O2)。O3 和 H2O2 均有杀菌作用。 [教学内容] 紫外线灭菌 实验八 [目的要求] 了解过滤除菌的原理；掌握微孔滤膜过滤除菌的方法。 [实验原理] 过滤除菌是通过机械作用滤去液体或气体中细菌的方法。根据不同的需要选用不同的滤器和滤板材料。此法除菌的最大优 点是可以不破坏溶液中各种物质的化学成分，但由于滤量有限，所以一般只适用于实验室中小量溶液的过滤除菌。 [教学内容] 微孔滤膜过滤除菌 实验九 [目的要求] 掌握倒平板的方法和几种常用的分离纯化微生物的基本操作技术 [实验原理] 从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。常用的方法有：1).简易单细胞 挑取法; 2).平板分离法。 土壤是微生物生活的大本营，它所含微生物无论是数量还是种类都是极其丰富的。因此土壤是微生物多样性的重要场所，是发掘微生物资 源的重要基地，可以从中分离、纯化得到许多有价值的菌株。 [教学内容] 微生物的分离与纯化 实验十 [目的要求] 1.了解不同的微生物在斜面上、半固体培养基和液体培养基中的生长特征。 2.进一步熟练和掌握微生物无菌操作技术。 [实验原理] 微生物的培养特征是指微生物在固体培养基上、半固体和液体培养基中生长后所表现出的群体形态特征。不同的微生物有 其固有的培养特征，这些特征一般用固体、半固体和液体培养基来进行检测。 检测微生物的培养特征时，接种和培养过程中必须保证不被其他微生物所污染，因此，除工作环境要求尽可能地避免或减少杂菌污染外， 熟练地掌握各种无菌操作接种技术是很重要。 [教学内容] 微生物的培养特征 实验十一 [目的要求] 1.学习微生物涂片、染色的基本技术，掌握细菌的简单染色法。2.初步认识细菌的形态特征。3.巩固显微镜(油镜)的使用方 法和无菌操作技术。 [实验原理] 简单染色法是利用单一染料对细菌进行染色的一种方法。此法操作简便，适用于菌体一般形状和细菌排列的观察。常用碱 性染料进行简单染色，这是因为：在中性、碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带负电荷，而碱性染料在电离时，其分子的染色部分带正 电荷(酸性染料电离时，其分子的染色部分带正电荷)，因此碱性染料的染色部分很容易与细菌结合使细菌着。染色后的细菌细胞与背景形 成鲜明的对比，在显微镜下更易于识别。常用作简单染色的染料有：美蓝、结晶紫、碱性复红等。 当细菌分解糖类产酸使培养基 pH 下降时，细菌所带正电荷增加，此时可用伊红、酸性复红或刚果红等酸性染料染色。 [教学内容] 细菌的简单染色法 实验十二 [目的要求] 1. 学习并初步掌握革兰氏染色法。2. 了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性